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一、用途及原理
用于大腸桿菌的快速鑒定（MUG試驗及靛基質(zhì)試驗）。
蛋白胨提供碳氮源；硫酸錳、硫酸鋅、硫酸鎂、氯化鈉和氯化鈣提供各種離子可維持均衡的滲透壓及利于目標菌的生長(cháng)；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉為緩沖劑；亞硫酸鈉和去氧膽酸鈉為選擇性抑菌劑，抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng)。葡萄糖醛酸苷酶在堿性條件下，作用于4-甲基傘形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide簡(jiǎn)稱(chēng)MUG)的β糖醛酸苷鍵，使其水解，釋放的4-甲基傘形酮在366nm紫外燈下產(chǎn)生藍白色熒光。
注：少數大腸埃希氏菌MUG試驗為陰性，少數非典型大腸埃希氏菌靛基質(zhì)試驗為陰性，有時(shí)需補充其他試驗進(jìn)行鑒定。
二、培養基配方（g/L）
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
磷酸二氫鉀 |
0.9 |
|
磷酸氫二鉀
|
6.2 |
|
硫酸錳 |
0.0005 |
|
亞硫酸鈉 |
0.04 |
|
去氧膽酸鈉 |
1.0 |
|
硫酸鎂 |
0.1 |
|
氯化鈉 |
5.0 |
|
氯化鈣 |
0.05 |
|
MUG |
0.075 |
|
硫酸鋅 |
0.0005 |
|
pH 7.3±0.1 25℃ |
|
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養成分以獲得最佳的結果
注：本培養基有少許沉淀。
三、操作步驟
1、稱(chēng)取本品23.37g， 加熱攪拌溶解于 1000ml純化水中，分裝試管，每管5ml，115℃高壓滅菌20分鐘，備用。
2、制備質(zhì)控菌液。
3、把質(zhì)控菌液加入試管中。
4、在30-35℃培養5-24小時(shí)，先置于366nm波長(cháng)紫外燈下觀(guān)察有無(wú)熒光，再滴加靛基質(zhì)試劑觀(guān)察有無(wú)玫紅色環(huán)出現。
注：靛基質(zhì)試劑為強酸性，滴入后會(huì )破壞水解生成的4-甲基傘形酮，導致在紫外燈下失去熒光，因此觀(guān)察試驗結果時(shí)，需先觀(guān)察熒光，再加入試劑觀(guān)察靛基質(zhì)反應。
四、試驗現象
接種以下質(zhì)控菌株，在30-35℃培養5-24小時(shí)：
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
生長(cháng)情況 |
其他特征 |
|
大腸埃希氏菌 |
CMCC(B)44102 |
>5000 |
+++ |
有熒光，靛基質(zhì)陽(yáng)性 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
>5000 |
+++ |
有熒光，靛基質(zhì)陽(yáng)性 |
|
金黃色葡萄球菌 |
CMCC(B)26003 |
>5000 |
- | / |
|
陰溝腸桿菌 |
ATCC22955 |
>5000 |
+++ |
無(wú)熒光，靛基質(zhì)陰性 |
 |
 |
圖1-2 4-甲基傘形通葡糖苷酸（MUG）培養基微生物質(zhì)控結果
備注：左為366nm紫外燈下拍攝，右為滴加靛基質(zhì)試劑后拍攝；
a：大腸埃希氏菌CMCC(B)44102 b：大腸埃希氏菌ATCC25922 c：陰溝腸桿菌 d：金黃色葡萄球菌
相關(guān)產(chǎn)品：
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
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