淺談滅菌前后培養基pH值差異的原因

  培養基是微生物試驗的基礎，直接影響微生物的試驗結果，而pH值又是培養基的重要監控項目。這是因為微生物的生長(cháng)不僅依賴(lài)豐富的營(yíng)養，還需要一個(gè)適宜的pH環(huán)境，只有在適宜的pH環(huán)境下微生物才能正常生長(cháng)繁殖或體現其生物特性，因此培養基pH值是否符合要求直接影響微生物檢驗結果。在培養基配制過(guò)程中，滅菌過(guò)程對培養基pH值影響尤為重要。我們常�？梢园l(fā)現，培養基在滅菌前后pH值有差異，一般滅菌后pH值都會(huì )有所下降，這是為什么呢？本文我們將和大家簡(jiǎn)單聊一下滅菌前后pH值變化的那些事。

一、滅菌的時(shí)間和溫度

  在高壓濕熱滅菌時(shí)，長(cháng)時(shí)間的高溫會(huì )對培養基產(chǎn)生很多不利的影響，例如會(huì )導致?tīng)I養物質(zhì)分解、營(yíng)養成分改變以及pH值變化，進(jìn)而影響微生物生長(cháng)。同時(shí)還可能引起培養基顏色變化、透明度降低、瓊脂凝膠強度變化等。培養基在滅菌過(guò)程中，滅菌的溫度和時(shí)間，高壓滅菌器升溫、降溫的速率，滅菌容器的容積和裝載方式等因素都對培養基的滅菌有著(zhù)重要影響。

二、培養基的成分

  在培養基的配制過(guò)程中我們會(huì )發(fā)現，同樣的滅菌溫度和時(shí)間，同樣的體積和裝量的不同培養基，在滅菌后pH值變化不同，有的培養基pH值變化較多，有的培養基pH值變化較少。這是因為不同培養基的成分不盡相同，而不同的成分在滅菌過(guò)程中對培養基ph值有著(zhù)不同的影響。糖類(lèi)和蛋白胨是培養基中最常見(jiàn)的兩種重要成分，那么這兩種成分分別對培養基滅菌后pH值有著(zhù)什么樣的影響呢？

  糖類(lèi)，例如葡萄糖、乳糖等作為碳源被微生物所利用。糖類(lèi)在高溫條件下會(huì )產(chǎn)生有機酸使培養基pH值下降。一般情況下，培養基含糖量越高，滅菌后pH值下降越多。如果過(guò)度滅菌pH值變化會(huì )更加明顯。同時(shí)，糖類(lèi)在高溫滅菌時(shí)容易焦化，使培養基顏色加深。

  蛋白胨一般作為培養基氮源，為微生物的生長(cháng)提供營(yíng)養物質(zhì)。蛋白胨在培養基滅菌時(shí)還能對培養基的pH值變化起到一定的緩沖作用。一般含胨量高的培養基，滅菌前后pH值變化相對較小。

  另外，若培養基成分中含有緩沖劑，如磷酸氫二鉀等，也可以減少培養基滅菌前后pH值的變化。

三、測量pH值時(shí)的溫度

  同一培養基在不同溫度下測得的pH值也會(huì )有一定差異，一般培養基的pH值會(huì )隨著(zhù)測量時(shí)溫度的升高而降低。培養基滅菌之后未完全冷卻時(shí)，測量的pH值一般會(huì )偏低，這是由于溫度升高時(shí)溶液中的游離離子數增多，測得的pH值較低；反之，當溫度降低時(shí)游離離子數減少，測得的pH值較高。通常我們在測定培養基pH值時(shí)，溫度控制在25℃左右。

  本文轉載自微信公眾號北京三藥。

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