一、試驗用途和原理
該培養基主要用于用于衛生環(huán)境表面微生物計數和分離培養。
胰蛋白胨和酵母粉提供氮源、維生素和生長(cháng)因子;葡萄糖提供碳源;硫代硫酸鈉、硫乙醇酸鈉、亞硫酸氫鈉、卵磷脂和吐溫80為中和劑,可中和醛類(lèi)消毒劑、含氯消毒劑、含碘消毒劑、季銨鹽類(lèi)消毒劑、過(guò)氧化物消毒劑等多種消毒劑的消毒作用;溴甲酚紫是酸堿指示劑;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L)
胰蛋白胨 |
5.0 |
酵母粉 |
2.5 |
葡萄糖 |
10.0 |
硫代乙醇酸鈉 |
1.0 |
硫代硫酸鈉 |
6.0 |
亞硫酸氫鈉 |
2.5 |
溴甲酚紫 |
0.02 |
卵磷脂 |
7.0 |
瓊脂 |
15.0 |
pH值7.6±0.2 | 25℃ |
三、試驗方法
1.稱(chēng)取本品49g,另取吐溫-80 5g加入,混勻,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘后,將滅菌完畢的培養基傾入無(wú)菌平皿中,備用。
2.將質(zhì)控菌株稀釋至合適梯度,使最終細菌含量為100-1000CFU/mL。
3.用移液槍吸取質(zhì)控菌株100μL加入備用的平皿中,涂布使菌液在培養基表面均勻涂開(kāi)。
4.將接好菌種的培養基放置于36±1℃需氧環(huán)境中倒置培養40-48小時(shí)。
四、實(shí)驗結果
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
回收率 |
生長(cháng)情況 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
TSA |
≥70% |
+++ |
黃色菌落 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
10-100 |
TSA |
≥70% |
+++ |
黃色菌落 |
鼠傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
TSA |
≥70% |
+++ |
黃色菌落 |
銅綠假單胞菌 |
ATCC27853 |
10-100 |
TSA |
≥70% |
+++ |
紫色菌落 |
枯草芽孢桿菌 |
ATCC6633 |
10-100 |
TSA |
≥70% |
+++ |
紫色菌落 |
D/E中和瓊脂實(shí)驗結果:
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大腸埃希氏菌 黃色菌落 |
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金黃色葡萄球菌 黃色菌落 |
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鼠傷寒沙門(mén)氏菌 黃色菌落 |
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銅綠假單胞菌 紫色菌落 |
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枯草芽孢桿菌 紫色菌落 |
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品:
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。
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