一、培養基用途及原理
用于藥品中耐膽鹽革蘭氏陰性菌的檢驗。
明膠胰酶水解物、酵母浸出粉提供細菌生長(cháng)的基本營(yíng)養,脫氧膽酸鈉可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng),在酸性條件下脫氧膽酸鹽可沉淀析出;結晶紫可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌及部分真菌的生長(cháng);葡萄糖為唯一碳源,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂為凝固劑,中性紅為酸堿指示劑,酸性條件下為紅色,堿性條件下為橙黃色。
耐膽鹽革蘭氏陰性菌可在此培養基中生長(cháng),部分細菌可分解葡萄糖產(chǎn)酸,菌落顯桃紅色,周?chē)心扄}沉淀環(huán),產(chǎn)酸弱或不產(chǎn)酸的細菌可呈現淡紅色或橙黃色,菌落周?chē)ǔ](méi)有沉淀環(huán)。
二、培養基配方(g/L)
明膠胰酶水解物 |
7.0 |
酵母浸出粉 |
3.0 |
脫氧膽酸鈉 |
1.5 |
葡萄糖 |
10.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
中性紅 |
0.03 |
結晶紫 |
0.002 |
瓊脂 |
15.0 |
pH7.4±0.2 | 25℃ |
三、試驗方法
1、稱(chēng)取本品41.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,煮沸不要超過(guò)2分鐘,無(wú)需高壓滅菌。冷卻至50℃左右時(shí),混勻傾入無(wú)菌平皿,臨用時(shí)制備不得超過(guò)3小時(shí)。制備好的平板保存于2-8℃,應避免光線(xiàn)直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處,室溫保存。使用前,把制備好的平板放置室溫10-20分鐘。
2、制備質(zhì)控菌液。
3、選擇合適稀釋度的目標菌質(zhì)控菌液0.1ml,均勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個(gè)平板。
4、30-35℃倒置培養基培養18-24小時(shí),記錄實(shí)驗結果。
四、結果觀(guān)察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株,30-35℃倒置培養基培養18-24小時(shí):
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長(cháng)情況 |
回收率 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
CMCC(B)44102 |
10-100 |
+++ |
≥70% |
紅色菌落,有膽鹽沉淀環(huán) |
金黃色葡萄球菌 |
CMCC(B)26003 |
/ |
- |
/ |
抑制 |
銅綠假單胞菌 |
CMCC(B)10104 |
10-100 |
+++ |
≥70% |
淡紅色菌落至橙黃色菌落 |
紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂微生物質(zhì)控結果:
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|
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|
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銅綠假單胞菌 淡紅色菌落至橙黃色菌落 |
|
大腸埃希氏菌 紅色菌落,有膽鹽沉淀環(huán) |
|
金黃色葡萄球菌 抑制 |
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品:
紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂(EP7.0)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
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