一、用途
用于細菌的精氨酸雙水解酶試驗。
二、實(shí)驗原理
細菌前期利用培養基中的糖類(lèi)發(fā)酵產(chǎn)酸,使培養基變黃;酸性條件下可刺激細菌產(chǎn)生氨基酸脫羧酶,精氨酸水解后生成鳥(niǎo)氨酸、氨及CO2,鳥(niǎo)氨酸又在脫羧酶的作用下生成腐胺,腐胺和氨均為堿性物質(zhì),可使培養基變堿,顏色由黃變紫色,若細菌不能分解精氨酸產(chǎn)堿,培養基仍然呈黃色。
三、培養基配方(g/L)
酵母浸粉 |
3.0 |
L-精氨酸 |
5.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
溴甲酚紫 |
0.016 |
氯化鈉 |
30 |
pH6.8±0.1 | 25℃ |
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養成分以獲得最佳的結果
四、試驗方法
1、制備質(zhì)控菌液,將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他制備方法,制備成5 McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液。
2、用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線(xiàn)一圈,掰開(kāi)待用。
3、吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至生化管中,覆蓋300μL液體無(wú)菌石蠟,36±1℃培養24±3h后,觀(guān)察試驗結果。
五、結果觀(guān)察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株,在36±1℃需氧培養24±3h:
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
生長(cháng)情況 |
其他特征 |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
+++ |
陰性,黃色 |
霍亂弧菌 |
/ |
+++ |
陰性,黃色 |
溶藻弧菌 |
ATCC17749 |
+++ |
陰性,黃色 |
創(chuàng )傷弧菌 |
ATCC27562 |
+++ |
陰性,黃色 |
陰溝腸桿菌 |
ATCC23355 |
+++ |
陽(yáng)性,紫色 |
精氨酸雙水解酶肉湯生化管質(zhì)控結果:
六、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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