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一、試驗原理
TCBS瓊脂用于致病性弧菌的選擇性分離（GB、SN標準）。成分中的酵母浸粉、蛋白胨提供菌體生長(cháng)所需的氮源、碳源及維生素等各種生長(cháng)因子；較高濃度的氯化鈉提供了弧菌嗜鹽生長(cháng)的環(huán)境，其形成的高滲透壓抑制了其他細菌的生長(cháng)；蔗糖是可發(fā)酵碳源；枸櫞酸鈉、高pH堿性環(huán)境及硫代硫酸鈉的存在抑制腸道菌的生長(cháng)，另硫代硫酸鈉還提供硫源，在檸檬酸鐵存在的條件下可以檢測細菌產(chǎn)硫化氫；牛膽粉、牛膽酸鈉主要抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng)；溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭作為酸堿指示劑，在該平板上生長(cháng)的細菌若能利用蔗糖產(chǎn)酸，則使得混合指示劑（溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭）的顏色變成黃色；瓊脂起凝固的作用。
二、培養基配方（g/L）
|
酵母浸粉 |
5.0 |
|
蛋白胨 |
10.0 |
|
硫代硫酸鈉 |
10.0 |
|
枸櫞酸鈉 |
10.0 |
|
牛膽粉 |
5.0 |
|
牛膽酸鈉 |
3.0 |
|
蔗糖 |
20.0 |
|
氯化鈉 |
10.0 |
|
檸檬酸鐵 |
1.0 |
|
溴麝香草酚蘭 |
0.04 |
|
麝香草酚蘭 |
0.04 |
|
瓊脂 |
15.0 |
| pH值8.5-8.7 | 25℃ |
三、試驗方法
1.稱(chēng)取本品89g，煮沸溶解于1000mL蒸餾水（可根據培養需要擴大或縮小產(chǎn)品用量），冷至45-50℃，傾入無(wú)菌平皿，備用；
2.質(zhì)控菌液按國標等標準或其它方法制備而成；
3.取相應菌液按涂布或劃線(xiàn)方式接種于培養基中；
4.將接好菌的平板倒置放入恒溫培養箱，于36±1℃需氧培養18-24h，觀(guān)察實(shí)驗結果。
四、試驗結果判斷
1.外觀(guān)
此培養基煮沸滅菌后制備好的固體平板為綠色。
2.生物學(xué)實(shí)驗
接種以下質(zhì)控菌株，放入培養箱中，于36±1℃培養24±2h，觀(guān)察試驗結果。
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
參比或計數培養基 |
方法 |
質(zhì)控情況 |
|
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
20-200 |
3%NaCl TSA |
定量 |
PR≥0.2，藍綠色斗笠狀菌落，H2S陰性 |
|
溶藻弧菌 |
ATCC33787 |
20-200 |
3%NaCl TSA |
定量 |
PR≥0.2，黃色菌落，H2S陰性 |
|
霍亂弧菌 |
/ |
20-200 |
3%NaCl TSA |
定量 |
PR≥0.2，黃色菌落，H2S陰性 |
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
TCBS瓊脂微生物質(zhì)控結果：
 |
|
 |
|
 |
|
副溶血性弧菌 藍綠色斗笠狀菌落，H2S陰性 |
|
溶藻弧菌 黃色菌落，H2S陰性 |
|
霍亂弧菌 黃色菌落，H2S陰性 |
相關(guān)產(chǎn)品：
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
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