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一、大腸菌群簡(jiǎn)介
大腸菌群是指一群在37℃培養24h發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。主要由腸桿菌科中四個(gè)屬內的一些細菌所組成，即埃希氏菌屬、檸檬酸桿菌屬、克雷伯氏菌屬以及腸桿菌屬。該菌主要來(lái)源于人畜糞便，故以此作為糞便污染指標來(lái)評價(jià)食品的衛生質(zhì)量，推斷食品中有否污染腸道致病菌的可能。
二、試驗原理
MUGal培養基可用于大腸菌群快速檢測。培養基中的胰蛋白胨作為培養基中的基礎營(yíng)養物質(zhì)，提供細菌生長(cháng)所需的碳氮源、維生素和其他的生長(cháng)因子；氯化鈉維持培養基體系的滲透壓平衡；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀是培養基pH緩沖劑；月桂基硫酸鈉抑制革蘭氏陽(yáng)性菌；大腸菌群可產(chǎn)生β-半乳糖苷酶，分解液體培養基中的酶底物4-甲基傘形酮-β-D-半乳糖苷MUGal，使4-甲基傘形酮游離，在波長(cháng)366nm紫外燈照射下呈現藍色熒光。
三、培養基配方（g/L）
| 胰酪蛋白胨 | 20.0 |
| 氯化鈉 | 5.0 |
| 磷酸氫二鉀 | 2.75 |
| 磷酸二氫鉀 | 2.75 |
| 月桂基硫酸鈉 | 0.1 |
| MUGal | 0.05 |
| pH值7.0-7.2 | 25℃ |
四、試驗方法
1.稱(chēng)取本品30.7g，加熱攪拌溶解于1000mL蒸餾水中，分裝于20mm×150mm試管中，每管9mL，116℃高壓滅菌10分鐘，待培養基冷卻后，以無(wú)菌操作于每管培養液內加入0.1mL經(jīng)無(wú)菌水稀釋的500ug/ml頭孢磺啶液，備用。
2.10倍梯度稀釋法制備質(zhì)控菌液。
3.選擇合適稀釋度的質(zhì)控菌液100μL，接種到試管中，每一稀釋度接種兩個(gè)平行管；同時(shí)吸取稀釋液100μL，接種到試管中作為空白對照。
4.放置36±1℃需氧培養24-48小時(shí)，記錄試驗結果。
五、試驗結果判斷
接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養18-24小時(shí)。
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
方法 |
生長(cháng)情況 |
其他特征 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
定量 |
+++ |
渾濁，產(chǎn)熒光 |
|
產(chǎn)氣腸桿菌 |
CMCC(B)45103 |
10-100 |
定量 |
+++ |
渾濁，產(chǎn)熒光 |
|
鼠傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
定量 |
+++ |
渾濁，不產(chǎn)熒光 |
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
100-1000 |
定量 |
- |
抑制 |
MUGal培養基質(zhì)控結果：
|
正常光線(xiàn)下 |
 |
| a:空白對照；b:大腸桿菌；c:產(chǎn)氣腸桿菌；d:鼠傷寒沙門(mén)氏菌；e:金黃色葡萄球菌 |
|
|
|
366nm紫外燈照射下 |
 |
|
a:空白對照；b:大腸桿菌；c:產(chǎn)氣腸桿菌；d:鼠傷寒沙門(mén)氏菌；e:金黃色葡萄球菌
相關(guān)產(chǎn)品:
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。 |
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