一、用途
瑞氏染色液用于細胞瑞氏染色。
二、試驗原理
在瑞氏試劑中酸性伊紅和堿性美藍,經(jīng)氧化而含有天青。此三種染料分別和細胞核及漿中的-NH3+和-COO-等結合,使細胞核及胞漿著(zhù)色。細胞受染后,藍紅等顏色都較適中,核染質(zhì)、胞漿及其中之顆粒顯色較為清楚。
三、培養基配方(g/L)
瑞氏染色液A液 |
瑞氏染色液 | 0.1g |
|
甲醇 | 60ml |
瑞氏染色液B液 | 超純水 |
四、試驗過(guò)程與結果觀(guān)察
1.把樣品在載玻片上涂開(kāi),自然風(fēng)干如圖1。
圖1 羊血涂片
2.加入A液滿(mǎn)涂膜,固定1min。
3.加入B液蓋A液,加量為A液的2-3倍。使用洗耳球吹動(dòng)液體,保持液面有漣漪狀,使A 液與B液混勻。染色3-5min。
4.水洗,自然風(fēng)干后,鏡檢,結果如圖2。
圖2 瑞氏染色鏡檢
白細胞:黃色—紅色。
多形核粒細胞:核為暗紫色;顆粒為紅色-淡紫色;細胞質(zhì)為青色-粉色。
嗜伊紅性白血球:核為藍色;顆粒為紅色至桔色—紅色;細胞質(zhì)為藍色。
嗜堿性細胞:核為紫色至暗藍色;顆粒為深暗紫色。
淋巴細胞:核為暗紫色;細胞質(zhì)為天藍色。
血小板:顆粒為紫色至深紫色。
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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