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一、培養基用途
mCPC培養基用于致病性弧菌的選擇性分離。
二、檢驗原理
蛋白胨、牛肉粉作為培養基中的基礎營(yíng)養物質(zhì)，提供細菌生長(cháng)所需的碳氮源、維生素和其他的生長(cháng)因子；氯化鈉維持培養基體系的滲透壓平衡；多粘菌素B和多粘菌素E能抑制副溶血性弧菌和溶藻弧菌等非目標菌的生長(cháng)；纖維二糖為可發(fā)酵的糖類(lèi)；溴百里酚蘭和甲酚紅為pH指示劑；瓊脂是培養基的凝固劑。本培養基一纖維二糖作為鑒別劑，創(chuàng )傷弧菌可發(fā)酵纖維二糖產(chǎn)酸顯黃色。
三、培養基配方（g/L）
|
蛋白胨 |
10.0 |
| 氯化鈉 | 20.0 |
| 瓊脂 | 15.0 |
| 甲酚紅 | 0.04 |
| 溴百里酚蘭 | 0.04 |
| 牛肉粉 | 5.0 |
| pH值7.5-7.7 | 25℃ |
四、試驗方法
1.稱(chēng)取本品5.0克，加熱煮沸溶解90mL蒸餾水中，冷卻到48-55℃時(shí)加入10%纖維二糖水溶液10mL和1支mCPC添加劑（多粘菌素E 40000units和多粘菌素B 10000units）混勻，傾入無(wú)菌空平皿，無(wú)需高壓滅菌；
2.制備質(zhì)控菌液；
3.目標菌（創(chuàng )傷弧菌）：選擇合適稀釋度的質(zhì)控菌液100μL，均勻涂布于待測培養基上，每一稀釋度接種兩個(gè)平板；非目標菌（特異性）：使用1μL接種環(huán)挑取1環(huán)霍亂弧菌菌液，定性劃線(xiàn)接種于待測平板；非目標菌（選擇性）：分別使用1μL接種環(huán)挑取1環(huán)副溶血性弧菌、大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌菌液，在待測平板表面劃六條平行線(xiàn)；
4.放置36±1℃需氧培養24-48小時(shí)，記錄試驗結果。
五、試驗結果判斷
接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養24-48小時(shí)。
|
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質(zhì)控結果 |
其他特征 |
|
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
抑制 |
|
霍亂弧菌 |
/ |
/ |
/ |
定性 |
/ |
紫色菌落 |
|
創(chuàng )傷弧菌 |
ATCC27562 |
20-200 |
3%NaCl TSA |
定量 |
PR≥0.1 |
圓形扁平，中心不透明， 邊緣透明的黃色菌落 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
抑制 |
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
抑制 |
mCPC培養基質(zhì)控結果：
 |
|
 |
|
 |
|
副溶血性弧菌 抑制 |
|
霍亂弧菌 紫色菌落 |
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金黃色葡萄球菌 抑制 |
 |
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|
大腸埃希氏菌 抑制 |
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創(chuàng )傷弧菌 圓形扁平，中心不透明，邊緣透明的黃色菌落 |
相關(guān)產(chǎn)品：
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
