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一、用途
用于大腸桿菌O157：H7菌的選擇性分離培養。
二、實(shí)驗原理
蛋白胨、䏡胨提供氮源、維生素和生長(cháng)因子；氯化鈉維持均衡的滲透壓；山梨醇為可發(fā)酵的糖類(lèi)；牛膽鹽、結晶紫、亞碲酸鉀和頭孢克肟抑制革蘭氏陽(yáng)性菌；中性紅為pH指示劑；瓊脂是培養基的凝固劑。
三、培養基配方（g/L）
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蛋白胨 |
17.0 |
|
䏡胨 |
3.0 |
|
山梨醇 |
10.0 |
|
牛膽鹽 |
1.5 |
|
氯化鈉 |
5.0 |
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中性紅 |
0.03 |
|
結晶紫 |
0.001 |
|
瓊脂 |
13.5 |
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pH7.2±0.2 |
25℃ |
四、試驗方法
1、稱(chēng)取本品51.5g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝三角瓶，每瓶200ml，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至45-50℃左右時(shí)，加入一支山梨醇麥康凱瓊脂添加劑（含頭孢克肟0.01mg，亞碲酸鉀0.5mg），混勻，傾入無(wú)菌平皿，備用；
2、制備質(zhì)控菌液；
3、選擇合適稀釋度的目標菌質(zhì)控菌液0.1ml，均勻涂布于平板上，每一稀釋度接種兩個(gè)平板；
4、用1μL接種環(huán)取非目標菌質(zhì)控菌液1環(huán)，將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體，在平板表面劃六條平行直線(xiàn)，同時(shí)接種兩個(gè)平板；
5、36±1℃倒置培養基培養18-24小時(shí)，記錄實(shí)驗結果。
五、結果觀(guān)察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株，在36±1℃需氧培養18-24小時(shí)：
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質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質(zhì)控評定標準 |
其他特征 |
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
|
大腸埃希氏菌O157 |
ATCC35150 |
10-100 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
無(wú)色菌落，褐色中心 |
|
傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
定性 |
- |
粉紅色菌落 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
|
|
定性 |
- |
粉紅色菌落，周?chē)心扄}沉淀 |
山梨醇麥康凱瓊脂質(zhì)控結果：
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|
|
|
 |
|
大腸埃希氏菌O157 無(wú)色菌落，褐色中心 |
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大腸埃希氏菌 粉紅色菌落，周?chē)心扄}沉淀 |
|
|
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傷寒沙門(mén)氏菌 粉紅色菌落 |
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金黃色葡萄球菌 抑制 |
六、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品：
山梨醇麥康凱瓊脂基礎（SMAC）（SN標準）-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
注：本文屬海博生物原創(chuàng )，未經(jīng)允許不得轉載。
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