一、選擇性實(shí)驗
1.產(chǎn)品介紹
葡萄球菌選擇性瓊脂110主要用于金黃色葡萄球菌的分離及培養。
2.實(shí)驗原理
胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供微生物生長(cháng)所需的碳氮源、維生素和氨基酸;D-甘露醇為可發(fā)酵的糖類(lèi);乳糖為金黃色葡萄球菌可利用的糖類(lèi);氯化鈉用以維持反應體系的滲透壓;磷酸氫二鉀是緩沖劑;瓊脂作用是培養基凝固劑。
3.培養基配方
成分 |
用量(g/L) |
胰酪蛋白胨 |
10.0 |
酵母浸粉 |
2.5 |
明膠 |
30.0 |
D-甘露醇 |
10.0 |
乳糖 |
2.0 |
氯化鈉 |
75.0 |
磷酸氫二鉀 |
5.0 |
瓊脂 |
15.0 |
pH7.2±0.2 |
25℃ |
4.實(shí)驗方法
①稱(chēng)取本品149.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用;
②樣品液按國家標準、SN標準、ISO標準或其它方法制備而成;
③取適量樣品液涂布接種于已凝固好的葡萄球菌選擇性瓊脂110培養基平板上;
④將接好菌的平板倒置放入培養箱,于36±1℃培養18-24h,觀(guān)察菌株生長(cháng)情況。
5.結果判斷
接種以下質(zhì)控菌株,平板倒置放入36±1℃培養箱中,培養18-24h。
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長(cháng)情況 |
其它特征 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
+++ |
生長(cháng)良好,有明顯菌落 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
10-100 |
+++ |
生長(cháng)良好,有明顯菌落 |
表皮葡萄球菌 |
CMCC 26069 |
10-100 |
+++ |
生長(cháng)良好,有明顯菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
- |
生長(cháng)抑制 |
葡萄球菌選擇性瓊脂110微生物生長(cháng)結果如圖一。
a:金黃色葡萄球菌25923;b:金黃色葡萄球菌6538;c:表皮葡萄球菌26069;d:大腸埃希氏菌25922
圖一
二、驗證實(shí)驗
1.甘露醇發(fā)酵產(chǎn)酸實(shí)驗
配制0.04%的溴麝香草酚藍指示劑滴加于菌落,如變?yōu)辄S色,即為陽(yáng)性。
1.1實(shí)驗原理及現象
金黃色葡萄球菌可利用甘露醇產(chǎn)酸,溴麝香草酚藍指示劑為pH指示劑(變色范圍為pH值6.0~7.6),在酸性條件下顯黃色,即溴麝香草酚藍指示劑使金黃色葡萄球菌顯示陽(yáng)性實(shí)驗結果如圖二。
2.明膠液化實(shí)驗
將硫酸銨飽和水溶液滴加于菌落,10分鐘后,如圍繞菌落出現一清晰帶,即為陽(yáng)性。
2.1實(shí)驗原理及現象
金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生明膠酶,使明膠分解為氨基酸,從而失去凝固力,即顯示陽(yáng)性實(shí)驗結果如圖二。
a:金黃色葡萄球菌25923;b:金黃色葡萄球菌6538
圖二
三、注意事項
1.本產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗。
2.使用此培養基后續應輔助其他相關(guān)實(shí)驗驗證實(shí)驗結果。
相關(guān)產(chǎn)品:
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