一、實(shí)驗原理:
本培養基用于霍亂弧菌的生化試驗(SN標準)
牛肉粉、酵母粉、月示蛋白胨、蛋白胨提供氮源、維生素和礦物質(zhì),乳糖、葡萄糖是可發(fā)酵的糖,氯化鈉維持均衡的滲透壓,瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L):
成分 |
用量 |
|
牛肉粉 |
3.0 |
|
酵母粉 |
3.0 |
|
月示蛋白胨 |
15.0 |
|
蛋白胨 |
5.0 |
|
乳糖 |
5.0 |
|
葡萄糖 |
1.0 |
|
硫酸亞鐵 |
0.2 |
|
氯化鈉 |
20.0 |
|
硫代硫酸鈉 |
0.3 |
|
瓊脂 |
12.0 |
|
酚紅 |
0.024 |
|
pH7.2-7.6 |
25℃ |
三、實(shí)驗方法:
稱(chēng)取本品 64.5g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,分裝于試管內的 3/4 左右高度,121℃高壓滅菌 15 分鐘,放置高層斜面備用。
四、結果觀(guān)察與解釋
按標簽用法制備培養基,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時(shí)。
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長(cháng)情況 |
其它特征 |
霍亂弧菌非01群 |
HB081127A-1 |
/ |
+++ |
K/A,H2S(-),產(chǎn)氣(-) |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
/ |
+++ |
K/A,H2S(-),產(chǎn)氣(-) |
溶藻弧菌 |
ATCC17749 |
/ |
+++ |
K/A,H2S(-),產(chǎn)氣(-) |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
+++ |
A/A,H2S(-),產(chǎn)氣(+) |
鼠傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
+++ |
K/A,H2S(+),產(chǎn)氣(+) |
普通變形桿菌 |
ATCC13315 |
/ |
+++ |
K/A,H2S(+),產(chǎn)氣(+) |
實(shí)驗結果現象與說(shuō)明:
1.霍亂弧菌非01群、副溶血性弧菌、溶藻弧菌
斜面紅/底層黃:發(fā)酵葡萄糖但不發(fā)酵乳糖,是不發(fā)酵乳糖的特征的菌類(lèi)。
2.大腸埃希氏菌
斜面黃/底層黃:既發(fā)酵乳糖也發(fā)酵葡萄糖,產(chǎn)生大量的酸使整個(gè)培養基呈黃色,同時(shí)有產(chǎn)氣現象。
3.鼠傷寒沙門(mén)氏菌、普通變形桿菌
斜面紅/底層黃(部分區域黑色):發(fā)酵葡萄糖但不發(fā)酵乳糖同時(shí)產(chǎn)生硫化氫,是產(chǎn)硫化氫不發(fā)酵乳糖特征。
硫化氫的產(chǎn)生:這類(lèi)菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氫,硫化氫和培養基中的鐵鹽反應生成黑色的硫化亞鐵沉淀。
五、注意事項
能產(chǎn)生硫化氫的菌應及時(shí)觀(guān)察試驗結果,以免生成的硫化鐵形成黑色區域,遮蓋斜面與底層的顏色影響判斷結果。
相關(guān)產(chǎn)品:
霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。