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    霍亂雙糖鐵瓊脂實(shí)驗原理及現象

    楊小潔
    錄入時(shí)間:2020-12-4 10:51:58 來(lái)源:青島海博生物

    一、實(shí)驗原理:


     本培養基用于霍亂弧菌的生化試驗(SN標準)

      

     牛肉粉、酵母粉、月示蛋白胨、蛋白胨提供氮源、維生素和礦物質(zhì),乳糖、葡萄糖是可發(fā)酵的糖,氯化鈉維持均衡的滲透壓,瓊脂是培養基的凝固劑。


    二、培養基配方(g/L):


    成分

    用量

    牛肉粉

    3.0

    酵母粉

    3.0

    月示蛋白胨

    15.0

    蛋白胨

    5.0

    乳糖

    5.0

    葡萄糖

    1.0

    硫酸亞鐵

    0.2

    氯化鈉

    20.0

    硫代硫酸鈉

    0.3

    瓊脂

    12.0

    酚紅

    0.024

    pH7.2-7.6
    25℃


    三、實(shí)驗方法:



     稱(chēng)取本品 64.5g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,分裝于試管內的 3/4 左右高度,121℃高壓滅菌 15 分鐘,放置高層斜面備用。


    四、結果觀(guān)察與解釋

     

     按標簽用法制備培養基,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時(shí)。 

    質(zhì)控菌株

    菌株編號

    接種量(CFU)

    生長(cháng)情況

    其它特征

    霍亂弧菌非01群

    HB081127A-1

    /

    +++

    K/A,H2S(-),產(chǎn)氣(-)

    副溶血性弧菌

    ATCC17802

    /

    +++

    K/A,H2S(-),產(chǎn)氣(-)

    溶藻弧菌

    ATCC17749

    /

    +++

    K/A,H2S(-),產(chǎn)氣(-)

    大腸埃希氏菌

    ATCC25922

    /

    +++

    A/A,H2S(-),產(chǎn)氣(+)

    鼠傷寒沙門(mén)氏菌

    ATCC14028

    /

    +++

    K/A,H2S(+),產(chǎn)氣(+)

    普通變形桿菌

    ATCC13315

    /

    +++

    K/A,H2S(+),產(chǎn)氣(+)


      

     實(shí)驗結果現象與說(shuō)明:

     1.霍亂弧菌非01群、副溶血性弧菌、溶藻弧菌

     斜面紅/底層黃:發(fā)酵葡萄糖但不發(fā)酵乳糖,是不發(fā)酵乳糖的特征的菌類(lèi)。

     2.大腸埃希氏菌

     斜面黃/底層黃:既發(fā)酵乳糖也發(fā)酵葡萄糖,產(chǎn)生大量的酸使整個(gè)培養基呈黃色,同時(shí)有產(chǎn)氣現象。

     3.鼠傷寒沙門(mén)氏菌、普通變形桿菌

     斜面紅/底層黃(部分區域黑色):發(fā)酵葡萄糖但不發(fā)酵乳糖同時(shí)產(chǎn)生硫化氫,是產(chǎn)硫化氫不發(fā)酵乳糖特征。

     硫化氫的產(chǎn)生:這類(lèi)菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氫,硫化氫和培養基中的鐵鹽反應生成黑色的硫化亞鐵沉淀。


    五、注意事項


     能產(chǎn)生硫化氫的菌應及時(shí)觀(guān)察試驗結果,以免生成的硫化鐵形成黑色區域,遮蓋斜面與底層的顏色影響判斷結果。


     相關(guān)產(chǎn)品:

     霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情


     注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。

     

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