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本文總結了以下三個(gè)指導原則的變化和應對策略，全文較長(cháng)，請耐心讀完。
9203 藥品微生物實(shí)驗室質(zhì)量管理指導原則
9204 微生物鑒定指導原則
9205 藥品潔凈實(shí)驗室微生物監測和控制指導原則
說(shuō)明：2015：為2015版刪除部分 2020：為2020版新增或修改部分
9203 藥品微生物實(shí)驗室質(zhì)量管理指導原則
藥品微生物實(shí)驗室質(zhì)量管理指導原則用于指導藥品微生物檢驗實(shí)驗室的質(zhì)量控制。涉及生物安全的操作，應符合相應國家、行業(yè)、地方的標準和規定等。藥品微生物實(shí)驗室質(zhì)量管理指導原則包括以下幾個(gè)方面：人員、培養基、試劑、菌種、設施和環(huán)境條件、設備、樣品、檢驗方法、污染廢棄物處理、檢測結果質(zhì)量有效性的保證和檢測過(guò)程質(zhì)量控制、實(shí)驗記錄、結果的判斷和檢測報告、文件等。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
微生物實(shí)驗室應設置質(zhì)量負責人、技術(shù)管理者、檢驗人員、生物安全責任人、生物安全監督員、菌種管理員及相關(guān)設備和材料管理員等崗位，可通過(guò)一人多崗設置。
▲ 應對策略及注意事項：涉及微生物實(shí)驗室崗位職責及培訓，須考慮微生物實(shí)驗室需增加相應崗位及人員培訓，微生物實(shí)驗室質(zhì)量負責人的級別及組織架構如何設置需要關(guān)注。
應保證所有人員在上崗前接受培訓內容包括勝任工作所必需的設備操作、微生物檢驗技術(shù)等方面的培 訓培訓，如無(wú)菌操作、培養基制備、消毒、滅菌、注平板、菌落計數、菌種的轉種、傳代和保藏、潔凈區域的微生物監測、微生物檢查方法和鑒定基本技術(shù)等，經(jīng)考核合格后方可上崗。實(shí)驗人員應經(jīng)過(guò)實(shí)驗室生物安全方面的培訓，熟悉生物安全操作知識和消毒滅菌知識，保證自身安全，防止微生物在實(shí)驗室內部污染。實(shí)驗室應制定所有級別確定實(shí)驗人員的持續培訓的需求，制定繼續教育計劃，保證知識與技能不斷的更新。
▲ 應對策略及注意事項：人員上崗培訓中增加潔凈區域的微生物監測內容實(shí)驗室應確定人員具備承擔相應實(shí)驗室活動(dòng)的能力，以及評估偏離影響程度的能力。可通過(guò)參加內部質(zhì)量控制、能力驗證或使用標準菌株等方法實(shí)驗室間比對等方式客觀(guān)評估檢驗人員的能力，并授權從事相應的實(shí)驗室活動(dòng)，必要時(shí)對其進(jìn)行再培訓并重新評估。
微生物實(shí)驗室使用的培養基可按處方配制，也可使用按處方生產(chǎn)的符合規定的脫水培養基，或直接采用商品化的預制培養基。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
商品化的成品脫水合成培養基或預制培養基除了應附有應設立接收標準，并進(jìn)行符合性驗收：包括品名、批號、數量、生產(chǎn)單位、外觀(guān)性狀（瓶蓋密封度、內容物有無(wú)結塊霉變等）、處方和使用說(shuō)明外，還應注明、有效期、貯藏條件、適用性檢查試驗生產(chǎn)商提供的質(zhì)控菌和用途報告和/或其他相關(guān)材料（如配方變更）。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
在制備培養基時(shí)，應選擇質(zhì)量符合要求的脫水合成培養基或單獨配方組分進(jìn)行配制。脫水培養基應附有處方和不應使用說(shuō)明，配制時(shí)應按使用說(shuō)明上的要求 操作以確保培養基的質(zhì)量符合要求，結塊、或顏色發(fā)生變化或其他物理性狀明顯改變的脫水合成培養基不得使用。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
為保證培養基質(zhì)量的穩定可靠并符合要求，配制時(shí)，脫水合成培養基應按使用說(shuō)明上的要求操作，自制培養基應按配方準確配制。各脫水培養基或各配方組分應準確稱(chēng)量，并要求有一定應達到相應的精確度。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
應按照生產(chǎn)商提供或使用者驗證的參數進(jìn)行培養基應采用經(jīng)驗證的滅菌程序滅菌。商品化的成品預制培養基必須附有所用滅菌方法的資料。培養基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù)，特殊培養基可采用薄膜過(guò)濾除菌等技術(shù)。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
絕大多數的細菌和真菌培養基促生長(cháng)的質(zhì)量。滅菌器中培養基的容積和裝載方式也將影響加熱的速度。因此，應根據滅菌培養基的特性，進(jìn)行全面的滅菌程序驗證。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
應確定每批培養基滅菌后的 pH 值（冷卻至室溫 25℃測定）。若培養基處方中未列出 pH 值的范圍，除非經(jīng)驗證表明培養基的 pH 值允許的變化范圍很寬，否則，pH 值的范圍不能超過(guò)規定值±0.2。如需滅菌后進(jìn)行調整，應使用滅菌或除菌的溶液。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
商品化的成品預制培養基標簽上應標有名稱(chēng)、批號、生產(chǎn)日期、失效期及培養基的有關(guān)特性，生產(chǎn)商和使用者應根據培養基使用說(shuō)明書(shū)上的要求進(jìn)行貯藏，所采用的貯藏和運輸條件應使成品培養基最低限度的失去水分并提供機械保護。試驗的菌種可根據培養基的用途從相關(guān)通則附錄中進(jìn)行選擇
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
用于環(huán)境監控的培養基須特別防護，最好要雙層包裝和終端滅菌，如果不能采用終端滅菌的培養基，那么在使用前應進(jìn)行 100%的預培養以防止外來(lái)的污染物帶到環(huán)境中及避免出現假陽(yáng)性結果。
▲ 應對策略及注意事項：去掉了自制培養基使用前要100%的預培養的要求，減輕工作量
實(shí)驗室應有文件規定微生物實(shí)驗用培養基、原材料及補充添加物的采購、驗收、貯藏、制備、滅菌、質(zhì)量檢查與使用的全過(guò)程，并對培養基的驗收、制備、滅菌、貯藏（包括滅菌后）、質(zhì)量控制試驗和使用情況等進(jìn)行記錄，包括培養基名稱(chēng)，制造商、批號、表觀(guān)特性、配制日期和配制 人員的標識、稱(chēng)量、配制及分裝的體積、pH值、滅菌設備及程序等，按處方配制的培養基記錄還應包括成分名稱(chēng)及用量。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
實(shí)驗用關(guān)鍵試劑，在開(kāi)啟使用和貯藏過(guò)程中，應對每批試劑的適用性進(jìn)行驗證。實(shí)驗室應對試劑進(jìn)行管理控制，保存和記錄相關(guān)資料。實(shí)驗室應標明配制的所有試劑、試液及溶液的應貼好標簽，標明名稱(chēng)、制備依據、適用性、濃度、效價(jià)、貯藏條件、制備日期、有效期及制備人等信息。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
藥品微生物檢驗用的試驗菌來(lái)自認可的國內或國外菌種保藏機構的應為有明確來(lái)源的標準菌株，或使用與標準菌株所有相關(guān)特性等效的可以溯源的商業(yè)派生菌株。標準菌株的應來(lái)自認可的國內或國外菌種保藏機構，其復蘇、復壯或培養物的制備應按供應商提供的說(shuō)明或按已驗證的方法進(jìn)行。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
工作區域與辦公區域應分開(kāi)。微生物實(shí)驗室應專(zhuān)用，并與生產(chǎn)、辦公等其他領(lǐng)域區域分開(kāi)尤其是生產(chǎn)領(lǐng)域。
▲ 應對策略及注意事項：其他區域是否包括非微生物檢驗區域，和第3項關(guān)聯(lián)下是否以后會(huì )要求微生物實(shí)驗室從QC實(shí)驗室中獨立劃分出來(lái)
微生物實(shí)驗室的布局與設計應充分考慮到試驗設備安裝、良好微生物實(shí)驗室操作規范和實(shí)驗室安全的要求。以能獲得可靠的檢測結果為重要依據，且符合所開(kāi)展微生物檢測活動(dòng)生物安全等級的需要。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
微生物實(shí)驗室應劃分成包括相應的潔凈區域和活菌操作生物安全控制區域，同時(shí)應根據實(shí)驗目的，在時(shí)間或空間上有效分隔不相容的實(shí)驗活動(dòng)，將交叉污染的風(fēng)險降低到最低。活菌操作生物安全控制區域應該配備滿(mǎn)足要求的生物安全柜，以避免危害性的生物因子對實(shí)驗人員和實(shí)驗環(huán)境造成的危害。霉菌試驗要有適當的措施防止孢子污染環(huán)境。對人或環(huán)境有危害的樣品應采取相應的隔離防護措施。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
微生物基因擴增檢測實(shí)驗室原則上應設分隔開(kāi)的工作區域以防止污染，包括（但不限于）試劑配制與貯存區、核酸提取區、核酸擴增區和擴增產(chǎn)物分析區。同時(shí)，應對上述區域明確標識。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
一些樣品若需要證明微生物的生長(cháng)或進(jìn)一步分析培養物的特性，如再培養、染色、微生物鑒定或其他確定試驗均應在實(shí)驗室的活菌操作應在生物安全控制區域進(jìn)行。任何出現微生物生長(cháng)的培養物不得在實(shí)驗室無(wú)菌潔凈區域內打開(kāi)。對染菌的樣品及培養物應有效隔離，以減少假陽(yáng)性結果的出現。病原微生物的分離鑒定工作應在二級相應級別的生物安全實(shí)驗室進(jìn)行。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
實(shí)驗室應對進(jìn)出潔凈區域的人和物建立控制程序和標準操作規程，對可能影響檢驗結果的工作（如潔凈度驗證及監測、消毒、清潔維護等）或涉及生物安全的設施和環(huán)境條件的技術(shù)要求能夠有效地控制、監測并記錄。當條件滿(mǎn)足檢測方法要求方可進(jìn)行樣品檢測工作。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
為保證儀器設備處于良好工作狀態(tài)，應定期對其進(jìn)行維護和性能驗證，并保存相關(guān)記錄。儀器設備若脫離實(shí)驗室或被檢修，恢復使用前應其對其檢查或校準，以保證重新確認其性能符合要求。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
天平和標準砝碼應定期進(jìn)行校準，天平使用過(guò)程應采用標準砝碼進(jìn)行校準。每次使用完后應及時(shí)清潔，必要時(shí)用非腐蝕消毒劑進(jìn)行消毒。微生物實(shí)驗室對容量測定設備如自動(dòng)分配儀、移液槍、移液管等應進(jìn)行檢定，以確保儀器準確度。標有各種使用體積的儀器需要對使用時(shí)的體積進(jìn)行精密度的檢查，并且還要測定其重現性。對于一次性使用的容量設備，實(shí)驗室應該從公認的和具有相關(guān)質(zhì)量保證系統 的公司購買(mǎi)。對儀器適用性進(jìn)行初次驗證后，要對其精密度隨時(shí)進(jìn)行檢查。必要時(shí)應該對每批定容設備進(jìn)行適用性檢查。
▲ 應對策略及注意事項：減少工作量
滅菌設備的滅菌效果應滿(mǎn)足使用要求。應使用多種傳感器（如：溫度、壓力等）監控滅菌過(guò)程。對實(shí)際應用的滅菌條件和裝載狀態(tài)需定期進(jìn)行性能驗證，經(jīng)過(guò)維修或工藝變化等可能對滅菌效果產(chǎn)生影響時(shí)，應重新驗證。應定期使用生物指示劑檢查滅菌設備的效果并記錄，指示劑應放在不易達到滅菌的部位。日常監控可以采用物理或化學(xué)方式進(jìn)行。非簡(jiǎn)單壓力容器操作人員需持有特種作業(yè)人員證書(shū)。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
應由有資質(zhì)專(zhuān)業(yè)技能的人員進(jìn)行生物安全柜、層流超凈工作臺及高效過(guò)濾器的安裝與更換，要按照確認的方法進(jìn)行現場(chǎng)生物和物理的檢測，并定期進(jìn)行再驗證。
▲ 應對策略及注意事項：從官方認可向企業(yè)培訓傾斜
懸浮粒子計數器、浮游菌采樣器應定期進(jìn)行校準；pH 計、傳導計天平和其它類(lèi)似儀器的性能應定期或在每次使用前確認；
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
試驗樣品的采集，應遵循隨機抽樣的原則，并由經(jīng)過(guò)培訓的人員在受控條件下進(jìn)行抽樣。如有可能，，如需無(wú)菌抽樣，應采用無(wú)菌操作技術(shù)，并在具有無(wú)菌條件的特定抽樣區域中進(jìn)行。抽樣時(shí)，須采用無(wú)菌操作技術(shù)進(jìn)行取樣，防止樣品受到微生物的污染而導致假陽(yáng)性的結果環(huán)境應監測并記錄，同時(shí)還需記錄采樣時(shí)間。抽樣的任何消毒過(guò)程（如抽樣點(diǎn)的消毒）不能影響樣品中微生物的檢出。所抽樣的容器應貼有唯一性的品應有清晰標識，注明避免樣品混淆和誤用。標識應包括樣品名稱(chēng)、批號、抽樣日期、采樣容器、抽樣人等。抽樣應由經(jīng)過(guò)培訓的人員使用無(wú)菌設備在無(wú)菌條件下進(jìn) 行無(wú)菌操作。抽樣環(huán)境狀況應監測并記錄，同時(shí)還需記錄采樣時(shí)間信息，使標識安全可見(jiàn)并可追溯。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
樣品的任何異常狀況在檢驗報告中應有說(shuō)明。實(shí)驗室應按照書(shū)面管理程序對樣品進(jìn)行保留和處置。如果實(shí)驗用的是已知被污染的樣品，應該在丟棄前進(jìn)行滅菌應經(jīng)過(guò)無(wú)害化處理。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
藥典方法或其他相關(guān)標準中規定的方法是經(jīng)過(guò)驗證的，當進(jìn)行在引入檢測之前，實(shí)驗室應證實(shí)能夠正確地運用這些方法。樣品檢驗時(shí)，應所采用的方法應經(jīng)適用性確認。當發(fā)布機構修訂了標準方法，應在所需的程度上重新進(jìn)行方法適用性確認。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
實(shí)驗室應有妥善處理廢棄樣品、過(guò)期(或失效)培養基和有害廢棄物的設施和制度，旨在減少檢查環(huán)境和材料的污染。污染廢棄物的管理應符合國家和地方法規的要求，并應交由當地環(huán)保部門(mén)資質(zhì)認定的單位進(jìn)行最終處理必須符合國家環(huán)境和健康安全規定。處置，由專(zhuān)人負責并書(shū)面記錄和存檔。藥品微生物實(shí)驗室還應應當制定針對類(lèi)似于帶菌培養物溢出的意外所操作微生物危害的安全應急預案，規范生物安全事故發(fā)生時(shí)的操作流程和方法，避免和減少緊急事件制定處理規程對人員、設備和工作的傷害和影響。如：活的培養物灑出必須就地處理，不得使培養物污染擴散。實(shí)驗室還應配備消毒劑、化學(xué)和生物學(xué)的溢出處理盒等相關(guān)裝備。
▲ 應對策略及注意事項：加入EHS要求和第三項人員配備相對應
為保證評估實(shí)驗室在每個(gè)工作日檢測結果的持續有效，連貫性和與檢測標準的一致性，實(shí)驗室應制定對所承擔的工作進(jìn)行連續評估的程序。實(shí)驗室應制訂質(zhì)量控制程序和計劃，對內部質(zhì)量控制活動(dòng)的實(shí)施內容、方式、責任人及結果評價(jià)依據作出明確的規定。質(zhì)量控制計劃應盡可能覆蓋實(shí)驗室的所有檢測人員和所有檢測項目。對于藥品微生物檢測項目，實(shí)驗室應可定期對實(shí)驗環(huán)境的潔凈度、培養基的適用性、滅菌方法、菌株純度和活性（包括性能）、試劑的質(zhì)量等進(jìn)行監控并詳細記錄。實(shí)驗室應定期對檢測使用標準樣品（如需氧菌總數標準樣品等）、質(zhì)控樣品或用標準菌株人工污染的樣品等開(kāi)展內部質(zhì)量控制，并根據工作量、人員進(jìn)行技術(shù)考核�？梢酝ㄟ^(guò)加標試樣的使用、平行實(shí)驗和參加水平、能力驗證等方法使每個(gè)檢測人員所檢測項目的可變性處于控制之下，以 保證檢驗結果的一致性。實(shí)驗室應對重要的檢驗結果、外部評審等情況明確規定質(zhì)控頻次。在實(shí)施人員比對、設備如自動(dòng)化檢驗儀器等進(jìn)行比對比對和方法比對時(shí)，要選取均勻性和穩定性符合要求的樣品進(jìn)行。
▲ 應對策略及注意事項：從生產(chǎn)過(guò)程控制延伸到檢驗過(guò)程控制，為調查的可追溯性提供便捷。
外部質(zhì)量評估：實(shí)驗室應對評估結果進(jìn)行分析，適時(shí)改進(jìn)實(shí)驗結果的可靠性依賴(lài)于試驗嚴格按照標準操作規程進(jìn)行，而標準操作規程應指出如何進(jìn)行正確的試驗操作。為保證數據完整性，實(shí)驗記錄應包含所有關(guān)鍵的實(shí)驗細節，以便確認數據的完整性確�？芍貜驮搶�(shí)驗室活動(dòng)。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
實(shí)驗室原始記錄至少應包括以下內容：實(shí)驗日期、檢品名稱(chēng)、實(shí)驗人員姓名、標準操作規程編號或方法、實(shí)驗結果、偏差（存在時(shí)）、實(shí)驗實(shí)驗參數（所使用的如環(huán)境、設備、菌種、培養基和批號以及培養溫度等）、主管/復核人簽名。實(shí)驗記錄寫(xiě)錯時(shí)，用單線(xiàn)劃掉并簽字。原來(lái)可以是紙質(zhì)的，也可以是電子的。實(shí)驗記錄的修改應可追溯到前一個(gè)版本，并能保存原始及修改后的數據和文檔，包括修改日期、修改內容和修改人員。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
歸檔的數據不能抹去或被覆蓋。所有實(shí)驗室記錄應以文件形式應確保安全。電子數據應定期備份，其備份及恢復流程必須經(jīng)過(guò)驗證。紙質(zhì)數據應便于查閱。數據的保存并防止意外遺失， 記錄應存放在特定的地方并有登記期限應滿(mǎn)足相應規范要求，并建立數據銷(xiāo)毀規程，數據的銷(xiāo)毀應經(jīng)過(guò)審批。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
樣品檢驗應有重試的程序，如果依據分析調查結果發(fā)現試驗有錯誤而判實(shí)驗結果無(wú)效。那么這種情況必須記錄。實(shí)驗室也必須認可復試程序，，應進(jìn)行重試。如果需要，可按相關(guān)規定重新抽樣，但抽樣方法不能影響不符合規定結果的分析調查。上述情況應保留相關(guān)記錄。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
檢驗過(guò)程出現與微生物相關(guān)的不合規范的數據，均屬于微生物數據偏差（Microbial Data deviation, MDD）。對實(shí)驗室偏差數據的調查，有利于持續提高實(shí)驗室數據的可靠性。所有程序和支持文件，應保持現行有效并易于人員取閱。涉及生物安全的操作現場(chǎng)應防止文件被污染。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
9204 微生物鑒定指導原則
本指導原則為非無(wú)菌藥品微生物限度控制菌檢查中疑似菌的鑒定，以及藥物原料、輔料、制藥用水、中間體中間產(chǎn)品、終產(chǎn)品和環(huán)境等中檢出微生物的鑒定提供指導。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
藥典通則通用技術(shù)要求相應章節中對檢出微生物的鑒定做了明確規定，如“非無(wú)菌產(chǎn)品的微生物檢查：控制菌檢査（通則1106)”中選擇培養基或指示培養基上發(fā)現的疑似菌落需進(jìn)行鑒定
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
無(wú)菌產(chǎn)品的控制菌檢査一般應達到種屬藥典規定的水平；無(wú)菌試驗結果陽(yáng)性和、無(wú)菌生產(chǎn)模擬工藝（如培養基模擬灌裝）失敗、環(huán)境嚴重異常事件時(shí)，對檢出的微生物鑒定至少達到種屬水平，必要時(shí)需達到菌株水平。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
未知菌鑒定時(shí)通過(guò)與微生物鑒定系統中的標準參考微生物(模式菌株等、標準菌株或經(jīng)確認的菌株）的特征（基因型和/或表型）相匹配來(lái)完成。如果數據庫中沒(méi)有此模式對應的菌株信息，就無(wú)法獲得正確的鑒定結果
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
常見(jiàn)的初篩試驗包括革蘭染色、芽孢形態(tài)觀(guān)察，染色、鏡檢觀(guān)察染色結果和細胞形態(tài)（或氫氧化鉀拉絲試驗）、重要的生化反應等
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
目前已有的基于碳源利用和生化反應特征化學(xué)分類(lèi)的鑒定方法在進(jìn)行結果判斷時(shí)需借助于系統自身的鑒別鑒定數據庫單獨的表型鑒定結果就能給出充足一定的信息幫助調查人員進(jìn)行深入調查所以DNA-DNA雜交、聚合酶鏈式反應、1 6S rR N A序列和18S rRNA序列、多位點(diǎn)，DNA探針、DNA-DNA雜交，多為點(diǎn)序列分型、焦磷酸測序、D N A探針和核糖體分型分析核糖體分型分析，16S核糖體RNA(16S ribosomal RNA)核酸測序、18S核糖體RNA（18S ribosomal RNA)核酸測序、間轉錄間隔區（Internal transcribed spacer,ITS）核酸測序和全基因組合測序等基因型微生物鑒定方法理論上更值得信賴(lài)�；蜩b定法不但技術(shù)水平需要保證，還需要昂貴的分析設備和材料，通常僅在關(guān)鍵在無(wú)菌檢查結果陽(yáng)性、非無(wú)菌藥品控制菌檢查中疑似菌的鑒定、環(huán)境監控異常、偏差調查、培養基模擬灌裝失敗等微生物調查中使用，如產(chǎn)品不合格調查。若使用，方法必須經(jīng)過(guò)確認。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
表2 系統發(fā)育典型的分析方法是通過(guò)比較細菌16S rRNA或真菌18S rRNA基因的部分ITS區域堿基序列來(lái)實(shí)現，即經(jīng)過(guò)聚合酶鏈反應（PCR)進(jìn)行基因擴增、電泳分離擴增產(chǎn)物、以雙脫氧鏈終止法進(jìn)行堿基測序，然后與經(jīng)驗證過(guò)的專(zhuān)用數據庫或利用公共的數據庫(不一定經(jīng)過(guò)驗證)進(jìn)行比對
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
表2微生物分類(lèi)學(xué)的基因型/系統發(fā)育的特征基因型：DNA-DNA雜交、DNA堿基比例（如G+C)、核酸序列、限制性酶切片段圖譜和DNA探針 系統發(fā)育結構：16SrRNA序列和18SrRNA序列、26SrRNA序列、ITS區基序、 全基因組序列該方法經(jīng)過(guò)樣品收集、核酸提取、目的片段擴增、雜交和檢測等步驟對所用的微生物鑒定系統的鑒定結果應進(jìn)行評估，同時(shí)還應考慮其一致性水平，合適的微生物鑒定系統，試驗菌株與模式參考微生物的一致性水平通常應大于90%一般而言，微生物親緣關(guān)系同源性小于或等于97%被認定為不同的屬，那些親緣關(guān)系同源性小于或等于99%被認定為不同的種
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
細菌16SrDNArRNA基因核酸序列和真菌的18SrDNA為各自的ITS核酸序列在結構與功能上具有高度保守序列區域，對種水平的鑒定是非常有用的，但不足以區分親緣關(guān)系近的不同種或同種中的不同株。與此相反，性，是微生物核酸測序鑒定和分類(lèi)中得廣泛應用的DNA特征性核酸序列之一，方法易標準化，鑒定結果可以滿(mǎn)足一般菌株鑒定的要求。限制性核酸內切酶進(jìn)行酶解的Southern雜交是能有效地顯示兩個(gè)株之間的差異。如果帶型表現的完全相同則僅能說(shuō)明限制性核酸內切酶在兩株菌根據菌株基因組的那個(gè)DNA中的特定區域是否具有相似的酶切位點(diǎn)，要證明兩株菌是同一株時(shí)應該包括兩個(gè)或更多不同限制性核酸是否可得到一致的酶切雜交譜帶，進(jìn)行菌株的鑒定和分類(lèi)，適用于菌株之間的同源性分析。脈沖場(chǎng)凝膠電泳是根據菌株基因組DNA中限值性內切酶的酶解物，每個(gè)內切酶都可得到一定的DNA區域的譜帶，所有來(lái)自?xún)芍昃淖V帶都必須完全一致。如脈沖場(chǎng)電泳等，就是利用此原理后條帶的數量和大小，進(jìn)行菌株分型的技術(shù)手段，應用于菌株之間的同源性分析時(shí)，結果較限制性核酸內切酶酶解的方法更準確。全基因組核酸測序可以得到菌株核酸水平的全部遺傳信息，通過(guò)核酸測序的比對分析，進(jìn)行菌株的鑒定、分析與溯源，結果更加客觀(guān)、準確，是溯源分析技術(shù)的發(fā)展趨勢。在區分的同源性高的不同種或同種中的不同株時(shí)，應根據需要，采用適宜的基因型鑒定方法或采用多種方法聯(lián)用，對鑒定結果進(jìn)行確認。
▲ 應對策略及注意事項：工作不涉及無(wú)法給出建議
9205 藥品潔凈實(shí)驗室微生物監測和控制指導原則
藥品潔凈實(shí)驗室是指用于藥品無(wú)菌或微生物檢驗用的潔凈實(shí)驗室區域、隔離系統及其他受控環(huán)境。潔凈實(shí)驗室若有超凈工作臺、空氣調節系統等的關(guān)鍵設備發(fā)生重大變化時(shí)應重新進(jìn)行參數測試。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
表1 各級別潔凈環(huán)境物理參數建議標準及最長(cháng)監測周期 潔凈區壓差、溫度和相對濕度最長(cháng)監測周期，壓差每周6個(gè)月/次，溫度每次實(shí)驗6個(gè)月/次，相對濕度每次實(shí)驗6個(gè)月/次
▲ 應對策略及注意事項：關(guān)于壓差、溫濕度的監測頻次放寬
藥品潔凈實(shí)驗室應定期進(jìn)行微生物日常監測，和定期監測，日常監測一般包括壓差、溫度、相對濕度等；定期監測應在風(fēng)險評估的基礎上建立潔凈環(huán)境監測計劃。定期監測內容包括物理參數、非生物活性的空氣懸浮粒子和有生物活性的微生物監測，其中微生物監測包括環(huán)境浮游菌和沉降菌監測，及關(guān)鍵的檢測臺面、人員操作服表面及5指手套等的微生物檢測。當潔凈區有超凈工作臺、空氣調節系統等關(guān)鍵設備發(fā)生重大改變時(shí)應重新進(jìn)行監測；當微生物監測結果或樣品測定結果產(chǎn)生偏離，經(jīng)評估潔凈區可能存在被污染的風(fēng)險時(shí)，應對潔凈區進(jìn)行清潔消毒后重新進(jìn)行監測。
▲ 應對策略及注意事項：需要修改相關(guān)文件，以滿(mǎn)足要求
懸浮粒子監測1 懸浮粒子監測方法 除取樣點(diǎn)的選擇和數量取樣量和取樣時(shí)間外，藥品潔凈實(shí)驗室懸浮粒子的監測參考《醫藥工業(yè)潔凈室（區）懸浮粒子的測試方法》的現行國家標準進(jìn)行。2 取樣點(diǎn)的選擇和數量 取樣點(diǎn)的選擇應具有代表性，應考慮潔凈室布局、 設備配置和氣流系統的特點(diǎn)，可以根據風(fēng)險情況在最少取樣點(diǎn)數量基礎上增加取樣點(diǎn)。
▲ 應對策略及注意事項：潔凈區懸浮粒子采樣點(diǎn)變化，與國標對接統一標準 1微生物監測方法
1. 微生物監測方法藥品潔凈實(shí)驗室懸浮粒子的監測《醫藥工業(yè)潔凈室（區）浮粒子的測試方法》的現行國家標準進(jìn)行。沉降菌的監測照《醫藥工業(yè)潔凈室（區）沉降菌的測試方法》的現行國家標準進(jìn)行；浮游菌的監測照《醫藥工業(yè)潔凈室（區）浮游菌的測試方法》的現行國家標準進(jìn)行,浮游菌采樣器可選擇撞擊式采樣器或濾膜式采樣器等。
▲ 應對策略及注意事項：浮游菌采樣器進(jìn)行了相對明確規定
2、接觸碟法和擦拭法采用的培養基、培養溫度和時(shí)間同浮游菌或沉降菌監測。表面菌測定應在實(shí)驗結束后進(jìn)行。環(huán)境浮游菌、沉降菌及表面微生物監測用培養基一般采用胰酪大豆胨瓊脂培養基（TSA），必要時(shí)可加入適宜的中和劑。當監測結果有疑似真菌或考慮季節因素影響時(shí)，可增加沙氏葡萄糖瓊脂 培養基(SDA)。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
3. 監測頻次及項目 在藥品潔凈實(shí)驗室監控中，監測頻次及監測項目建議按表224進(jìn)行。如果出現連續超過(guò)糾偏限和警戒限、關(guān)鍵區域內發(fā)現有污染微生物存在、空氣凈化系統進(jìn)行任何重大的維修、消毒規程改變、設備有重大維修或增加、潔凈室（區）結構或區域分布有重大變動(dòng)、引起微生物污染的事故、日常操作記錄反映出傾向性的數據時(shí)應考慮修改監測頻次重新評估監測程序的合理性。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
223微生物監測標準各潔凈級別空氣懸浮粒子的標準見(jiàn)表3.各潔凈級別環(huán)境微生物監測的動(dòng)態(tài)標準見(jiàn)表445①表中各數值均為各個(gè)取樣點(diǎn)的平均值；測定值；③如果試驗時(shí)間少于4小時(shí)，則仍應使用表中的限度。表5注解中③A級環(huán)境的樣品，正常情況下應無(wú)微生物污染。561數據分析 應當對日常環(huán)境監測數據進(jìn)行分析和回顧，通過(guò)收集的數據和趨勢分析，總結和評估潔凈實(shí)驗室是否受控，評估警戒限和是否合適，評估所評估及所采取的糾偏措施是否合適。恰當。應當正確評估微生物污染，不僅僅關(guān)注微生物數量和種類(lèi)，更應關(guān)注微生物污染檢出的頻率，往往通常在一個(gè)采樣周期內同一環(huán)境中多點(diǎn)發(fā)現微生物污染，可能預示著(zhù)風(fēng)險增加，應仔細評估。幾個(gè)位點(diǎn)同時(shí)有污染的現象也可能由不規范的采樣操作引起，所以在得出環(huán)境可能失控的結論之前，應仔細回顧采樣操作過(guò)程。在污染后的幾天對環(huán)境進(jìn)行重新采樣對于調查污染原因意義不大，因為采樣過(guò)程不具有可重復性。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
為了保證藥品潔凈實(shí)驗室環(huán)境維持適當的水平，并處于受控狀態(tài)，除應保持空調系統的良好運行狀態(tài)，對設施進(jìn)行良好維護外，潔凈室內人員應嚴格遵守良好的行為規范，并定期進(jìn)行環(huán)境監控，減少人員干預比檢測更有效。其次是通過(guò) 有效控制人員和物品的移動(dòng)，適當的控制溫度和濕度。監測，微生物控制措施還包括良好的清潔和衛生處理，應定期對藥品潔凈實(shí)驗室進(jìn)行清潔和消毒，應當監測消毒劑和清潔劑的微生物污染狀況，并在規定的有效期內使用，A/B級潔凈區應當使用無(wú)菌的或經(jīng)無(wú)菌處理的消毒劑和清潔劑。所采用的化學(xué)消毒劑應經(jīng)過(guò)驗證或有證據表明其消毒效果，其種類(lèi)應當多于一種，并定期進(jìn)行更換以防止產(chǎn)生耐受菌株。不得用紫外線(xiàn)消毒代替化學(xué)消毒。必要時(shí)，可采用氣體、熏蒸等適宜的方法降低潔凈區的衛生死角的微生物污染，并對熏蒸劑消毒劑的殘留水平進(jìn)行驗證。
▲ 應對策略及注意事項：基本無(wú)影響
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