菌種的復蘇與傳代 

  1.以無(wú)菌操作方式開(kāi)啟凍干菌種管，加入適量培養液（按菌種選擇培養液，如細菌選擇營(yíng)養肉湯、白色念珠菌選擇沙堡液體培養基、分枝桿菌選擇蘇通綜合液體培養基、黑曲霉菌選擇麥芽浸膏營(yíng)養肉湯培養基），吹吸數次，使菌種融化分散。取含5.0 mL～10.0 mL相應培養液的試管，滴入少許菌種懸液，在適宜溫度下培養至規定時(shí)間（一般為36 ℃±1 ℃培養18 h～24 h、黑曲霉菌為30 ℃± 1℃培養42 h～48 h），此為第1代培養物。

  2.用接種環(huán)取第1代培養物，或從菌種凍存管中取適量菌液/瓷珠，劃線(xiàn)接種于相應培養基平板（按菌種選擇培養基，如細菌選擇營(yíng)養瓊脂培養基、白色念珠菌選擇沙堡瓊脂培養基、分枝桿菌選擇改良羅氏培養基或其他商品化分枝桿菌專(zhuān)用復合瓊脂培養基、黑曲霉菌選擇麥芽浸膏瓊脂培養基），在適宜溫度下培養至規定時(shí)間（一般為36 ℃±1 ℃培養18 h～24 h、分枝桿菌36 ℃± 1℃培養72 h、黑曲霉菌30 ℃±1 ℃培養42 h～48 h），此為第2代培養物。

  3.挑取第2代培養物中典型菌落，接種于相應培養基斜面或平板（按菌種選擇培養基斜面，如細菌選擇營(yíng)養瓊脂斜面、白色念珠菌選擇沙堡瓊脂斜面、分枝桿菌選擇改良羅氏培養基或其他商品化分枝桿菌專(zhuān)用復合瓊脂斜面、黑曲霉菌選擇麥芽浸膏瓊脂培養基平板），在適宜溫度下培養至規定時(shí)間（一般為36 ℃±1 ℃培養18 h～24 h、分枝桿菌36 ℃±1 ℃培養72 h、黑曲霉菌30 ℃±1 ℃培養42 h～48 h），此為第3代培養物。

  4.取第3代培養物，接種于相應培養基斜面，在適宜溫度下培養至規定時(shí)間，此為第4代培養物。5.1.5 按上述方法培養至所需代數，傳代時(shí)在試管上注明菌種名稱(chēng)、菌種號、代數及傳代日期等基本信息。

  本文節選自中華人民共和國衛生行業(yè)標準《WS/T 683—2020消毒試驗用微生物要求》

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