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    茜素-β-半乳糖苷瓊脂原理及實(shí)驗現象

    李令梅
    錄入時(shí)間:2020-7-24 9:50:24 來(lái)源:青島海博生物

    一、試驗原理:

     

     用于食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測和計數(GB/T4789.32-2002)。

     胰酪胨提供氮源、維生素和礦物質(zhì)滿(mǎn)足細菌生長(cháng)的需求;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀是緩沖劑;月桂基硫酸鈉抑制革蘭氏陽(yáng)性菌;大腸菌群可產(chǎn)生β-半乳糖苷酶,分解培養基中的酶底物茜素-β-D-半乳糖苷(Aliz-gal),使茜素游離,并與培養基中的鋁、鉀、鐵、銨離子結合形成紫色(或紅色)的螯合物,使菌落呈現相應的顏色。

     

    二、培養基配方(g/L):

     

    胰酪胨

    20.0

    氯化鈉

    5.0

    磷酸氫二鉀

    2.75

    磷酸二氫鉀

    2.75

    月桂基硫酸鈉

    0.1

    異丙基硫代半乳糖苷

    0.03

    硫酸鋁鉀

    0.5

    檸檬酸鐵銨

    0.5

    瓊脂

    15.0

    茜素-β-D-半乳糖苷

    0.05

    pH 7.1±0.1

    25℃


    三、試驗方法:

     

     1、稱(chēng)取本品46.7g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,116℃高壓滅菌10分鐘,冷卻至50℃左右時(shí),傾入無(wú)菌平皿,備用。

     2、制備好的平板保存于2-8℃,應避免光線(xiàn)直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處,室溫保存。

     4、使用前,把制備好的平板放置室溫10-20分鐘。

     5、制備質(zhì)控菌液。選擇合適稀釋度的質(zhì)控菌液0.1ml,均勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個(gè)平板。用1μL接種環(huán)取非目標菌質(zhì)控菌液1環(huán),將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線(xiàn),同時(shí)接種兩個(gè)平板。36±1℃℃倒置培養基培養18-24小時(shí),記錄實(shí)驗結果。


    四、結果觀(guān)察與解釋 

                                             

     接種以下質(zhì)控菌株,36±1℃需氧培養18-24小時(shí):

    質(zhì)控菌株

    菌株編號

    接種量(CFU)

    參比或計數培養基

    方法

    質(zhì)控評定標準

    其他特征

    金黃色葡萄球菌

    ATCC6538

    /

    /

    半定量

    G≤1

    /

    傷寒沙門(mén)氏菌

    ATCC14028

    /

    /

    定性

    -

    粉色菌落

    大腸埃希氏菌

    ATCC25922

    20-200



    PR≥0.5

    紫紅色菌落

    陰溝腸桿菌

    ATCC23355

    20-200

    TSA

    定量

    PR≥0.5

    紫紅色菌落

    弗氏檸檬酸桿菌

    ATCC43864

    20-200



    PR≥0.5

    紫紅色菌落


    a:大腸埃希氏菌,b:金黃色葡萄球菌,c:傷寒沙門(mén)氏菌,d:陰溝腸桿菌,e:弗氏檸檬酸桿菌,f:空白對照


    五、注意事項

     

     本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。


     相關(guān)產(chǎn)品:

     茜素-β-半乳糖苷瓊脂(Aliz-gal瓊脂)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情


     注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。

     

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