一、試驗原理:
用于食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測和計數(GB/T4789.32-2002)。
胰酪胨提供氮源、維生素和礦物質(zhì)滿(mǎn)足細菌生長(cháng)的需求;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀是緩沖劑;月桂基硫酸鈉抑制革蘭氏陽(yáng)性菌;大腸菌群可產(chǎn)生β-半乳糖苷酶,分解培養基中的酶底物茜素-β-D-半乳糖苷(Aliz-gal),使茜素游離,并與培養基中的鋁、鉀、鐵、銨離子結合形成紫色(或紅色)的螯合物,使菌落呈現相應的顏色。
二、培養基配方(g/L):
胰酪胨 |
20.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
磷酸氫二鉀 |
2.75 |
磷酸二氫鉀 |
2.75 |
月桂基硫酸鈉 |
0.1 |
異丙基硫代半乳糖苷 |
0.03 |
硫酸鋁鉀 |
0.5 |
檸檬酸鐵銨 |
0.5 |
瓊脂 |
15.0 |
茜素-β-D-半乳糖苷 |
0.05 |
pH 7.1±0.1 |
25℃ |
三、試驗方法:
1、稱(chēng)取本品46.7g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,116℃高壓滅菌10分鐘,冷卻至50℃左右時(shí),傾入無(wú)菌平皿,備用。
2、制備好的平板保存于2-8℃,應避免光線(xiàn)直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處,室溫保存。
4、使用前,把制備好的平板放置室溫10-20分鐘。
5、制備質(zhì)控菌液。選擇合適稀釋度的質(zhì)控菌液0.1ml,均勻涂布于平板上,每一稀釋度接種兩個(gè)平板。用1μL接種環(huán)取非目標菌質(zhì)控菌液1環(huán),將接種環(huán)接觸容器邊緣3次去除多余液體,在平板表面劃六條平行直線(xiàn),同時(shí)接種兩個(gè)平板。36±1℃℃倒置培養基培養18-24小時(shí),記錄實(shí)驗結果。
四、結果觀(guān)察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株,36±1℃需氧培養18-24小時(shí):
質(zhì)控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質(zhì)控評定標準 |
其他特征 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
傷寒沙門(mén)氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
定性 |
- |
粉色菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落 |
陰溝腸桿菌 |
ATCC23355 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.5 |
紫紅色菌落 |
弗氏檸檬酸桿菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
|
|
PR≥0.5 |
紫紅色菌落 |
a:大腸埃希氏菌,b:金黃色葡萄球菌,c:傷寒沙門(mén)氏菌,d:陰溝腸桿菌,e:弗氏檸檬酸桿菌,f:空白對照
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
相關(guān)產(chǎn)品:
茜素-β-半乳糖苷瓊脂(Aliz-gal瓊脂)-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情
注:本文屬海博生物原創(chuàng ),未經(jīng)允許不得轉載。
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