在做各種樣品(藥品、醫療器械、化妝品、保健食品)的微生物檢驗中,經(jīng)常會(huì )看到質(zhì)量標準中會(huì )涉及CFU/g或CFU/ml。還有一些標準中單位是個(gè)/g或者個(gè)/ml。這些到底有什么差別,我們要從CFU的基本定義開(kāi)始。
CFU:A colony-forming unit(CFU,cfu,CFu)is a unit used in microbiology to estimate the number of viable bacteria or fungal cells in a sample.
翻譯過(guò)來(lái)就是:菌落形成單位是指微生物學(xué)中用于估算樣品中活的細菌或者真菌數量的單位。
直觀(guān)來(lái)說(shuō),小小的一個(gè)微生物不是肉眼可見(jiàn)的,必須借助高倍顯微鏡甚至染色后才能清楚觀(guān)察到。CFU是通過(guò)平板培養基上肉眼可見(jiàn)的菌落數來(lái)反推樣品中微生物數量的一種方式,這期間發(fā)生了分散、稀釋、培養等等過(guò)程。
首先,CFU是菌落形成單位,數據不是直接反映樣品中的微生物數量。是一種認可的估算。估算成功的前提是平板涂布或者接種之前微生物活細胞分散均勻。而一些鏈球菌、球菌等天生就不能單細胞分散均勻。另外一個(gè)因素是稀釋倍數合理,有些樣品的微生物含量很高,要想計數必須梯度稀釋很多次,最后CFU區間落在30-300之間最為有效。太多太少都不合適。
其次,能夠在平板上生長(cháng)出來(lái)的活的微生物才會(huì )形成CFU。理論上,分散均勻的情況下,一個(gè)活細胞形成1CFU。在實(shí)際操作中,渦旋振蕩進(jìn)行混勻就會(huì )出現很多情況。微生物是分散程度更好了,但是有一些被振死了。
另外,微生物最終能在平板培養基上形成菌落還與培養基類(lèi)型、培養溫度及時(shí)間、接種方式、潛在微生物類(lèi)型有關(guān)系。
總而言之,CFU是一種估算方法。當出現CFU時(shí),就代表了已經(jīng)選擇了這種估算方式,不同的單位(如下圖所示)也代表了過(guò)程的前后。
最后,來(lái)說(shuō)說(shuō)CFU的現實(shí)意義。舉例來(lái)說(shuō),定量菌種的菌種數量如果標示的是“CFU”,也就代表這種定量菌種也是用培養基法來(lái)計數的。如果定量菌種是用流式細胞儀等其他方式計數,標示“個(gè)”更為合理。
菌落計數不一定需要專(zhuān)業(yè)設備,如果你的手機支持Google Play的話(huà),可以下載APD Colony Counter App專(zhuān)業(yè)版,手機拍照就可以實(shí)現拍照計數,界面如下圖。
本文轉載自微信公眾號石決明。
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