HBI大腸桿菌生化鑒定條使用方法

一、產(chǎn)品介紹

 產(chǎn)品用途：用于大腸桿菌IMViC試驗鑒定。

 產(chǎn)品組成：包含靛基質(zhì)試驗（吲哚試驗）、甲基紅試驗（MR）、V-P試驗、西蒙氏檸檬酸鹽利用試驗四項生化反應。

 配套試劑：需配套使用Kovacs氏靛基質(zhì)試劑、甲基紅試劑、V-P試劑。

二、接種方法及結果記錄

 1.實(shí)驗準備：從包裝盒中取出一條生化鑒定條，打開(kāi)蓋子，用打孔器開(kāi)孔或直接把膜撕掉。如果染菌或變色，則不能使用，重新拿一條。注：打孔器用75%酒精擦拭后使用。

 2.接種方法：取一內盛2ml無(wú)菌水或無(wú)菌生理鹽水試管，用接種針或接種環(huán)從營(yíng)養瓊脂平板上挑取1-2個(gè)菌落至無(wú)菌生理鹽水中仔細研磨制成均一細菌懸液，每孔加入100uL菌懸液。

 3.接種完后做好標記，蓋上蓋子，放入底托中，放置36℃±1℃培養。

 4.結果記錄：

 靛基質(zhì)試驗：培養18-24h后，滴加1-2滴Kovacs氏靛基質(zhì)試劑，如有玫紅色環(huán)出現，則記“+”（陽(yáng)性），如為黃色環(huán)，則記“-”（陰性）；

 甲基紅試驗（MR）：培養24-48h后，滴加1-2滴甲基紅試劑，如顯紅色，則記“+”，如顯橙黃色，則記“-”;

 V-P試驗：培養24-48h后，滴加V-P試劑A液3滴和B液1滴混勻，繼續培養0.5-4h，如變紅，則記“+”，如4h不變紅或顯橙黃色，則記“-”；

 西蒙氏檸檬酸鹽：培養24-48h后，如出現變藍色，則記“+”，如48h不變藍色，則記“-”。

三、結果判定

 結果判定需參考《GB4789.38-2012食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗大腸埃希氏菌計數》。標準中對大腸桿菌的定義為：“廣泛存在于人和溫血動(dòng)物的腸道中，能夠在44.5℃發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，IMViC（靛基質(zhì)、甲基紅、VP試驗、檸檬酸鹽）生化試驗為“++--”或“-+--”的革蘭氏陰性桿菌”。

 因此，若待測菌在大腸桿菌生化鑒定條得出結果為“++--”或“-+--”，并且同時(shí)滿(mǎn)足“能夠在44.5℃發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣”和“革蘭氏陰性桿菌”兩個(gè)條件，方可確定待測菌為大腸桿菌（可用EC肉湯培養基或乳糖發(fā)酵培養基鑒定待測菌是否能夠在44.5℃發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，可用革蘭氏染色法觀(guān)察待測菌是否為革蘭氏陰性桿菌）。

 注意事項：本產(chǎn)品僅用于測定大腸桿菌的IMViC試驗，不能僅憑此鑒定條確證是否為大腸桿菌，必須同時(shí)結合乳糖發(fā)酵試驗和革蘭氏染色，可判斷是否為大腸桿菌（如普通變形桿菌，IMViC試驗結果雖與大腸桿菌相同，但乳糖發(fā)酵試驗為陰性，以此進(jìn)行排除）。

 相關(guān)產(chǎn)品：

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