硫乙醇酸鹽流體培養基制備及常見(jiàn)問(wèn)題解答

一、用途及介紹

  用途：此培養基常用于藥品及生物制品中的需氧/厭氧菌檢驗及厭氧菌的增菌培養。

  培養基狀態(tài)和性質(zhì)：制備好的硫乙醇酸鹽流體培養基呈淡黃色透明流體狀，有一定黏度，上下分層。上層由于接觸空氣中的氧氣，培養基內含的刃天青顯淡紅色，需氧菌可在此處生長(cháng)。下層為厭氧層，呈淡黃色，厭氧菌可在此處生長(cháng)。

  優(yōu)點(diǎn)：硫乙醇酸鹽流體培養基中因含有少量瓊脂，培養基內無(wú)液體對流現象，且含有還原性的胱氨酸、硫乙醇酸鈉，因此可以穩定地保持下層的厭氧環(huán)境。在進(jìn)行厭氧菌的增菌培養時(shí)，無(wú)需借助厭氧罐、厭氧培養箱等設備，也無(wú)需覆蓋液體石蠟，即可達到良好的培養效果，因此非常適合用于厭氧菌的復蘇及增菌培養。

二、使用方法及注意事項

  培養基制備：參照標簽，按比例稱(chēng)取培養基加熱溶解于純化水中，分裝至試管或瓶中，121℃高壓滅菌，冷卻后備用。

  注意事項：

  1.培養基中含有少量瓊脂，因此在滅菌前需加熱煮沸至培養基內的瓊脂完全溶解且分布均勻，方可進(jìn)行分裝，滅菌；

  2.培養基分裝容器時(shí)，裝量應與容器比例合適，選擇細高型容器分裝更有利于減少氧化層的高度，若分裝密閉容器中空氣較多，可充入氮氣后再進(jìn)行密封；

  3.使用前注意觀(guān)察培養基氧化層的高度，在供試品檢查前，培養基氧化層高度不能超過(guò)培養基深度的1/5；若超過(guò)1/5，可對培養基進(jìn)行沸水浴加熱驅氧，只限加熱一次；

  4.硫乙醇酸鹽流體培養基不可振蕩培養，只能靜置培養。振蕩會(huì )使培養基上下層產(chǎn)生液體對流，無(wú)法維持下層培養基的無(wú)氧狀態(tài)，因此會(huì )導致厭氧菌不能生長(cháng)。

三、常見(jiàn)問(wèn)題

  1.制備好的培養基整瓶呈現淡黃色，看不到紅色氧化層是怎么回事？

  答：通常在密閉容器里的硫乙醇酸鹽流體培養基會(huì )出現這個(gè)現象。硫乙醇酸鹽流體培養基上層只有接觸氧氣才會(huì )變紅，若上層沒(méi)有氧氣接觸，就會(huì )整體呈淡黃色。自制密閉滅菌后的培養基，若容器內殘留空氣很少，或滅菌前進(jìn)行了充氮氣排氧，滅菌后可能會(huì )看不到氧化層。

  2.滅菌后培養基是澄清的，冷卻后出現部分白色絮狀物，是什么原因？

  答：硫乙醇酸鹽流體培養基內有少量瓊脂，如果配制不當，瓊脂未充分溶解分布均勻，滅菌冷卻后聚集的瓊脂凝固成團塊，就會(huì )出現白色絮狀物。因此在滅菌前必須加熱至瓊脂完全溶解并充分攪拌，使瓊脂在培養基中分布均勻，再進(jìn)行高壓滅菌，冷卻后的培養基就是澄清的淡黃色透明流體狀。

  3.滅菌后的培養基顏色偏深黃，且pH偏低不合格，是什么原因？

  答：這種情況一般是滅菌過(guò)度造成的。培養基中的酵母浸粉和葡萄糖在滅菌過(guò)度后易出現糖焦化現象，造成顏色偏深，pH下降，嚴重時(shí)可能觀(guān)察不到氧化層。因此在培養基滅菌結束后，需及時(shí)從滅菌鍋中取出，避免長(cháng)時(shí)間滅菌或保溫，更不可重復高壓滅菌。

  4.滅菌后的培養基，分裝試管使用時(shí)，整根試管變紅色，是否還能使用？

  答：此培養基建議先加熱煮沸溶解，分裝，再滅菌。如先滅菌后分裝，由于分裝過(guò)程中培養基接觸氧氣，剛分裝結束時(shí)，部分培養基可能呈現全紅色，一般室溫靜置1h左右可重新見(jiàn)到分層現象。如靜置后仍然整體培養基呈紅色不分層，可沸水浴加熱驅氧，冷卻后即可重新出現分層。重新分層的培養基可正常使用。

相關(guān)產(chǎn)品：

硫乙醇酸鹽流體培養基（中國藥典）-點(diǎn)擊查看產(chǎn)品詳情

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