普通光學(xué)顯微鏡的使用

 微生物的最顯著(zhù)特點(diǎn)就是個(gè)體徽小，必須借助顯微鏡才能觀(guān)察到它們的個(gè)體形態(tài)和細胞結構。熟悉顯微鏡和掌握其操作技術(shù)是研究微生物不可缺少的手段。本部分將介紹目前微生物學(xué)研究中最常用的普通光學(xué)顯微鏡及電子顯微鏡、相差顯徽 
操作步驟
1 ．觀(guān)察前的準備
( l ）顯微鏡的安置 顯微鏡于平整的實(shí)驗臺上，鏡座距實(shí)驗臺邊緣約3 一4 cm ．鏡檢時(shí)姿勢要端正。
取放顯微鏡時(shí)應一手握住鏡翻，一手托住勝座、使顯橄翔保持直立、平穩。切忌用單手拎提；且不論使用單藺顯微鏡或雙筒顯微鏡均應雙眼同時(shí)睜開(kāi)觀(guān)典，以減少眼叻使勞．也便干邊觀(guān)索邊繪圈或記錄．
( 2 ）光源調節安裝在鏡座內的光源燈可通過(guò)調節電壓以獲得適當的照明亮度，而使用反光鏡采集自然光或燈光作為照明光源時(shí)，應根據光源的強度及所用物鏡的放大倍數選用凹面或凸面反光鏡并調節其角度，使視野內的光線(xiàn)均勻，亮度適宜。
( 3 ）根據使用者的個(gè)人情況，調節雙筒顯微鏡的目鏡雙筒顯微鏡的目鏡間距可以適當調節，而左目鏡上一般還配有曲光度調節環(huán)，可以適應眼距不同或兩眼視力有差異的不同觀(guān)察者．侈）聚光器數值孔徑值的調節調節聚光器虹彩光圈值與物鏡的數值孔徑值相符或略低，有些顯微鏡的聚光器只標有最大數值孔徑值，而沒(méi)有具體的光圈數刻度．使用這種顯微鏡時(shí)可在樣品聚焦后取下一目鏡，從鏡筒中一邊看著(zhù)視野，一邊縮放光圈，調整光圈的邊緣與物鏡邊緣黑圈相切或略小于其邊緣．因為各物鏡的數值孔徑值不同，所以每轉換一次物鏡都應進(jìn)行這種調節．
2 ．顯微觀(guān)察
在目鏡保持不變的情況下．便用不同放大倍數的物鏡所能達到的分辨率及放大率都是不同的，一般情況下，特別是初學(xué)者，進(jìn)行顯微觀(guān)察時(shí)應遵守從低倍鏡到高倍鏡再到油鏡的觀(guān)察程序。因為低倍數物鏡視野相對大，易發(fā)現目標及確定檢查的位1 , 
( 1 ）低倍鏡觀(guān)寮將金黃色有萄球菌染色標本玻片里于載物臺上．用標本夾夾住，移動(dòng)推進(jìn)器使觀(guān)察對象處在物鏡的正下方．下降10 丫物鏡，使其接近標本，用粗調節器怪怪升起鏡筒，使標本在視野中初步聚焦，再使用細調節器調節圖像清晰．通過(guò)玻片夾推進(jìn)器慢，移動(dòng)玻片，認真觀(guān)察標本各部位，找到合適的目的物，仔細觀(guān)察并記錄所觀(guān)察到的結果．
( 2 ）高倍鏡觀(guān)察在低倍鏡下找到合適的觀(guān)察目標并將其移至視野中心后，輕輕轉動(dòng)物鏡轉換器將高倍鏡移至工作位置．對聚光器光圈及視野亮度進(jìn)行適當調節后微調細調節器便物像清晰，利用推進(jìn)器移動(dòng)標本仔細觀(guān)察并記錄所觀(guān)察到的結果．
( 3 〕 油鏡觀(guān)察  在高倍鏡或低倍鏡下找到要觀(guān)察的樣品區域后，用粗調節器將鏡筒升高，然后將油鏡轉到工作位置。在待觀(guān)察的樣品區域加滴香柏油，從側面注視，用粗調節器將鏡筒小心地降下、使油鏡浸在鏡油中井幾乎與標本相接。將聚光器升至最高位置并開(kāi)足光圈，若所用聚光器的數值孔徑值超過(guò)1 , O ，還應在聚光鏡與載破片之間也加滴香柏油，保證其達到最大的效能．調節照明使視野的亮度合適，用粗調節器將鏡簡(jiǎn)徐徐上升，直至視野中出現物像并用細調節器使其清晰準焦為止．．
3 顯微鏡用畢后的處理
( I ）上升鏡筒，取下載玻片‘
( 2 ）用舞鏡紙拭去鏡頭上的鏡油，然后用擦鏡紙蘸少許二甲笨〔 香拍油溶于二甲苯》 擦去鏡頭上殘留的油跡，最后再用干凈的擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。
切忌用手或井他紙報拭鏡頭．以免使鏡頭沾上污益或產(chǎn)生劃液．影響觀(guān)察．
實(shí)驗報告
1 ．結果
分別繪出你在低倍鏡、高倍鏡和油鏡下觀(guān)察到的金黃色有萄球菌、枯革芽孢桿菌、鏈鑲菌及青霉的形態(tài)，包括在三種情況下視野中的變化，同時(shí)注明物鏡放大倍數和總放大率。2 ．思考題
( l ）用油鏡觀(guān)察時(shí)應注意哪些問(wèn)題寧在載玻片和鏡頭之間加滴什么油？起什么作用？
( 2 ）試列表比較低倍鏡、高倍鏡及油鏡各方面的差異。為什么在使用高倍鏡及油鏡時(shí)應特別注意避免粗調節器的誤操作？
( 3 ）什么是物鏡的同焦現象？它在顯微鏡觀(guān)察中有什么意義？
( 4 ）影響顯微鏡分辨率的因素有哪些呀
( 5 ）根據你的實(shí)驗體會(huì )，談?wù)剳�如何根據所觀(guān)察微生物的大小，選擇不同的物鏡進(jìn)行有效的觀(guān)察．
  
   

 

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