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1.方法一(紙條法)
(1)培養基
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蛋白胨 |
10g |
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NaCl |
5g |
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牛肉膏 |
10g |
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半胱氨酸 |
0.5g |
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蒸餾水 |
1000ml |
pH 7.0～7.4.分裝試管，每管液層高度4～5 cm,112℃滅菌20～30 min。另外將普通濾紙剪成0.5～1cm寬的紙條，長(cháng)度根據試管與培養基高度而定。用5%～10％的醋酸鉛將紙條浸透，然后用烘箱烘干，放于培養皿中滅菌備用。
（2）接種與觀(guān)察：用新鮮斜面培養物接種培養基。接種后，用無(wú)菌攝子夾取一條醋酸鉛紙條用棉塞塞緊，使懸掛于管中，下端接近培養基表面，不接觸液面，適溫培養。于接種后3,7,14天觀(guān)察。紙條變黑色者為陽(yáng)性，不變者為陰性。
（3）注意事項：①此方法比較敏感，本培養基不適用于腸桿菌科。 ②紙條高度應放置適當，離液面太遠影響靈敏度，太近容易濺濕。同時(shí)移動(dòng)試管架時(shí)也要平穩。③除空白對照外，應放陰性對照。
2.方法二（腸桿菌）
（1）培養基
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牛肉膏 |
7.5g |
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蛋白胨 |
10g |
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NaCl |
5g |
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明膠 |
100-120g（或瓊脂15g） |
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10%FeCl2（培養基滅菌后無(wú)菌加入） |
5ml |
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蒸餾水 |
1000ml |
pH 7.0,112℃滅菌20 min。
在明膠培養基尚未凝固時(shí)，加入新制備的過(guò)濾滅菌的FeCl2,用無(wú)菌試管分裝，培養基高度約為4-5 cm,立即置冷水冷卻凝固。
（2）接種與觀(guān)察：用穿刺法接種，30℃培養，1,3,7天，觀(guān)察，變黑者為陽(yáng)性，不變?yōu)殛幮浴?/span>
（3）注意事項：①此方法適于腸桿菌科細菌的鑒定。②在我們實(shí)驗室中用的是硫酸亞鐵代替氯化亞鐵。③可同時(shí)測定明膠液化，20℃培養。
本文節選自《常見(jiàn)細菌系統鑒定手冊》第十四章。
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