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1.方法一
（1）培養基
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L-色氨酸 |
3g |
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KH2PO4 |
1g |
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K2HPO4 |
1g |
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NaCl |
5g |
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乙醇（95%） |
10ml |
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蒸餾水 |
900ml |
加酚紅至微橙的黃色(25-30mg), pH約為6.8-6.9,分裝于三角瓶中，121℃蒸氣滅菌20min。另將20g尿素溶于100ml水中，過(guò)濾滅菌，用無(wú)菌操作與上述熱滅菌的培養基相混，并分裝于無(wú)菌試管內，每管液層高約3～4cm。
（2）接種與測定：將試驗菌株的幼齡培養物接種于上述培養液中，適溫培養24h,取2～4滴培養液，與1滴三氯化鐵溶液（約33%）相混。如呈紅褐色，則為色氨酸脫氨酶陽(yáng)性反應。如無(wú)顏色變化則為陰性反應�？捎米冃尉鳛殛�(yáng)性對照。
（3）結果觀(guān)察：如培養后的培養液由黃色轉紅色，表示有脲酶存在。如用對二甲基氨基苯甲醒試劑測定，可檢查有無(wú)吲哚形成。如不擬測定脲酶，配制培養基時(shí)可不加酚紅和尿素。
2.方法二
（1）試液
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L-色氨酸 |
0.%～0.5% |
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生理鹽水或pH6.8緩沖液（A液與B液相混即為pH6.8的緩沖液） |
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A液：KH2PO4,1/5mol/L（27.2g/L） |
50ml |
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B液：NaCO3，1/5mol（8.0g/L） |
23.6ml |
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FeCl3 |
33% |
（2）接種與培養
將試驗菌接種于肉汁陳斜面，適溫培養24h。
（3）測定方法
測定方法：取干凈的試管二支，每管中加四滴L-色氨酸0.2%-0.5％溶液和四滴生理鹽水（或四滴pH6.8緩沖液A和B)，然后將測定菌的菌苔混到上述溶液的二支試管中制成濃菌液。另二支試管中不加菌苔作為對照。置室溫15-20 min后，每管中加入一滴三氯化鐵（33%）溶液，立即呈現紅褐色，表示陽(yáng)性反應， 不變色者表示陰性反應�？捎米冃尉鳛殛�(yáng)性對照。
本文節選自《常見(jiàn)細菌系統鑒定手冊》第十四章。
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