氧化酶的生化特征鑒定

1.試劑

   鹽酸二甲基對苯撐二胺（或四甲基對苯撐二胺）1％水溶液于茶色瓶中在冰箱中貯存。

2.操作

   在干凈培養皿里放一張濾紙，滴上二甲基對苯撐二胺的1％水溶液，僅使濾紙濕潤即可，不可過(guò)濕。用白金絲接種環(huán)（不可用鎳鉻絲）取18-24 h的菌苔，涂抹在濕潤的濾紙上，在10s內涂抹的菌苔現紅色者為陽(yáng)性，（四甲基對苯撐二胺呈藍色）10～60s現紅色者為延遲反應，60s以上現紅色者不計，按陰性處理；

3.氧化酶試紙制作及測定法

   將質(zhì)地較好的濾紙（如新華1號濾紙）用1％鹽酸二甲基對苯撐二胺浸濕，在室內懸掛風(fēng)干。干后，剪裁成適當大小的紙條，放在有橡皮塞的試管中密封保存，在4℃冰箱中可存數月，使用前用白金絲接種環(huán)將菌苔抹在紙條上，于10s內出現紅色為氧化酶陽(yáng)性。如紙條儲存過(guò)久，顏色不明顯，則不宜使用。

4.操作注意事項

   （1）二甲基對苯撐二胺溶液易于氧化，一般可于冰箱中貯存二周。如溶液顏色轉紅褐色，則不宜使用。

   （2）鐵、鎂等金屬可催化二甲基對苯撐二胺呈紅色，故不宜用電爐絲或鐵絲等取菌苔。如無(wú)白金絲，可用玻棒或滅菌牙簽取菌苔涂抹。

   （3）在濾紙上滴加試液以剛剛濕潤為宜。如濾紙過(guò)濕，妨礙空氣與菌苔接觸，則延長(cháng)顯色時(shí)間，造成假陰性。

   本文節選自《常見(jiàn)細菌系統鑒定手冊》第十三章。

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