(一)方法一
(1)染色劑:繪圖墨汁;0.5%番紅溶液,純甲醇;
(2)染色步驟:在載片一端滴一滴無(wú)菌水,取少許菌苔在水滴中制成懸液。取一滴墨汁與菌懸液混合,并用另一載片之一端將此水滴在載片上刮成薄膜,風(fēng)于。用純甲醇固定1 min。加0.5%番紅液數滴滴于涂片上,沖去殘余甲醇,并染30s,然后傾去染液,立即吸于,備鏡檢。
(3)鏡檢;背景黑色,莢膜無(wú)色,細胞紅色。
(4)注意事項:經(jīng)比較,滬光繪圖墨水(上海墨水廠(chǎng))較好;北京繪圖碳素墨水(北京墨水廠(chǎng))顆粒太粗;北京墨汁(北京墨汁廠(chǎng))膠性太大。
(二) 方法二
1.染色劑
剛果紅(Congo red) |
2%水溶液 |
明膠 |
0.01%~0.1%水溶液 |
鹽酸 |
1% |
呂氏美藍:乙醇美藍飽和液(約2%) |
30ml |
KOH水溶液(0.01%) |
100ml |
2.染色步驟
將剛果紅水溶液和明膠水溶液各一滴滴于干凈的載玻片上;用接種環(huán)醮取細菌培養物或懸浮液在玻片上與上述兩滴溶液混勻并風(fēng)干;滴加1%的鹽酸沖洗,使圖片呈藍色;用蒸餾水漂洗,除去鹽酸;用美藍復染1min,風(fēng)干后鏡檢。
3.鏡檢
(1)有莢膜的菌,菌體藍色,莢膜不著(zhù)色,背景藍紫色;
(2)無(wú)莢膜的菌,菌體藍色,背景藍紫色。由于干燥菌體收縮,菌體四周也可能有一圈狹窄的不著(zhù)色環(huán),但這不是莢膜。莢膜的不著(zhù)色部分寬。
4.注意事項
(1)莢膜的產(chǎn)生與培養基有關(guān),所以應選用合適的培養基。在報告結果時(shí)應注明所用的培養基。
(2)有些動(dòng)物致病菌僅在動(dòng)物體內生長(cháng)時(shí)形成莢膜,而在培養基中培養時(shí)不形成莢
(3)不同的種,產(chǎn)生莢膜的時(shí)間不盡相同,必要時(shí)可在不同時(shí)間觀(guān)察。
(4)有時(shí)菌體著(zhù)色差。
本文節選自《常見(jiàn)細菌系統鑒定手冊》第十二章。
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