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    特殊的芽孢染色法簡(jiǎn)介



    錄入時(shí)間:2020-5-6 14:00:20 來(lái)源:青島海博生物

       芽孢通?稍诟锾m氏染色片中看到,但在不易清晰觀(guān)察時(shí),可用特殊的芽孢染色法,使芽孢與菌體分別呈現不同顏色,便于觀(guān)察。

     

    (一)孔雀綠染色法

     

       (1)將生有芽孢的斜面菌苔按革蘭氏染色法涂片后用飽和的孔雀綠(Malachite green)水溶液(約為7.6%)染10min

       (2)用自來(lái)水沖洗

       (3)用0.5%番紅液復染30s

       (4)水洗,吸干

       (5)鏡檢:芽孢呈綠色,菌體和芽孢囊呈微紅色,但應注意菌體中有異染粒時(shí),也可呈現綠色。

     

    (二)石炭酸復紅染色法

     

       1.染劑

     

       (1)石炭酸復紅液

    堿性復紅(Basic Fuchine,一品紅)


    乙醇飽和液(約10%)

    10ml

    石炭酸水溶液(5%)

    100ml

        

        兩液相混搖勻備用。

     

       (2)酸性乙醇

    乙醇(95%)

    100ml

    濃酸鹽

    3ml

     

       (3)呂氏美藍染液

    美藍(次甲基藍、亞甲藍、甲烯藍、Methylene blue)

    乙醇飽和液(約2%)

    30ml

    KOH水溶液(0.01%)

    100ml

    KOH 1%溶液1 ml加水99 ml即為0.015的KOH

        

        將兩液混合后備用,此液陳舊者更好。

     

       2.染色步驟

     

       (1)按常規涂片。

       (2)滴加石炭酸復紅于涂片上,并于玻片下緩緩加熱,使染液冒蒸氣但不沸騰,并繼續滴加染液,不使涂片上染液蒸干,這樣保持5 min。

       (3)涂片冷后,傾去染液,用酸性乙醇脫色至無(wú)紅色染劑洗脫為止。

       (4)徹底水洗。

       (5)用呂氏美藍復染2~3 min。

       (6)水洗、吸干、鏡檢。

     

       3.觀(guān)察結果

     

        鏡檢時(shí),菌體及孢囊呈藍色,芽孢呈紅色。

        本文節選自《常見(jiàn)細菌系統鑒定手冊》第十二章。

     

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