判定試驗菌是否有運動(dòng)性的方法

（一）半固體瓊脂穿刺法

  根據有鞭毛的細菌可以在半固體培養基中游動(dòng)卻又不能任意游走的現象，觀(guān)察細菌生長(cháng)情況，判定試驗菌是否有運動(dòng)性�？墒褂迷囼灳�能良好生長(cháng)的培養基，在其中加0.3%～0.6％的瓊脂，（所用的瓊脂量可因牌號不同而異）一般半固體培養基應是放倒試管不流動(dòng)，而在手上輕輕敲打時(shí)瓊脂即破裂為宜。對一般常見(jiàn)細菌可結合葡萄糖氧化發(fā)酵試驗觀(guān)察運動(dòng)性。

  用直針穿刺接種試驗菌于半固體培養基內，適溫培養。細菌的運動(dòng)性可用透射光目測。如生長(cháng)物只生長(cháng)在穿刺線(xiàn)上，邊緣十分清晰，則表示試驗菌無(wú)運動(dòng)性；如生長(cháng)物由穿刺線(xiàn)向四周呈云霧狀擴散，其邊緣呈云霧狀，則表示試驗菌株有運動(dòng)性。對生長(cháng)快的細菌應培養1天后觀(guān)察。如第一天不能判定可在第2～3天再觀(guān)察。如2～3天時(shí)仍不能判定是否有運動(dòng)性，可延遲5～6天再觀(guān)察一次。因為游動(dòng)力弱的細菌，在半固體培養基中第1～2天中尚不能從穿刺線(xiàn)游開(kāi)，故需多培養幾天觀(guān)察。如試驗菌在半固體培養基中產(chǎn)氣，氣泡會(huì )將穿刺線(xiàn)上的生長(cháng)物的擴散情況，不可誤將不運動(dòng)的細菌判為有運動(dòng)性。如試驗菌是好氧細菌，穿刺線(xiàn)上生長(cháng)物很少，可檢查從培養基表面向下滲人的生長(cháng)物的情況。

（二）鏡檢法

  用顯微鏡檢查細菌細胞是否能游動(dòng)，可用普通顯微鏡或相差顯微鏡檢查。用普通顯微鏡時(shí)光線(xiàn)不宜太強，要適當減弱。檢查時(shí)應注意以下幾點(diǎn)：

  1.細菌細胞間有明顯位移者，才能判定為運動(dòng)性。由于細菌細胞太小，在懸液中有布朗運動(dòng)，即每個(gè)細胞均在原地顫動(dòng)，彼此的位置關(guān)系卻沒(méi)改變， 切不可將這種現象誤判為具運動(dòng)性。 由于載片與蓋片之間懸液過(guò)多，在使用油浸物鏡調焦時(shí)，懸液在蓋玻片下流動(dòng)。這時(shí)可看到大批細菌細胞都以同一速度向同一方向運動(dòng)，這也不是真正的運動(dòng)性。真正的運動(dòng)性應是細菌細胞彼此的位置關(guān)系明顯的改變。細菌的運動(dòng)性因種或菌株而異。有的運動(dòng)迅速，有的運動(dòng)緩慢。能運動(dòng)的菌株也不一定每個(gè)細胞都同時(shí)運動(dòng)，常常是大多數細胞不運動(dòng)。少數細胞明顯運動(dòng)。

  2.有些細胞不以鞭毛運動(dòng)而是滑動(dòng)。鏡檢時(shí)應注意與游動(dòng)區分開(kāi)。一般游動(dòng)速度高，滑動(dòng)則遲緩。游動(dòng)只能在懸液中運動(dòng)，滑行則須附在固體表面進(jìn)行。

  3.如室溫太低，以致載物臺溫度太低。有的細菌會(huì )因溫度太低而不能運動(dòng)，應設法提高載物臺或載玻片的溫度，達到試驗菌能運動(dòng)的溫度（如在室溫較高的試驗室鏡檢，或將載玻片放置保溫箱中一會(huì )兒再觀(guān)察）。

  4.鏡檢好氧菌時(shí)，則可能因蓋玻片下供氧不足而使試驗菌不能表現出運動(dòng)性，遇到這種情況則應使蓋玻片下殘留一二個(gè)小氣泡，鏡檢氣泡四周或蓋片邊緣處的細菌運動(dòng)性。

  5.用油鏡檢時(shí)，蓋玻片的厚度以不超過(guò)0.17mm為宜。用過(guò)厚的蓋玻片時(shí)，調焦有困難。用相差油鏡觀(guān)察時(shí)載玻片的厚度約為1.2mm為宜。

  本文節選自《常見(jiàn)細菌系統鑒定手冊》第十二章。

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