革蘭氏染色的方法

（一）染劑(Hucker修改法）

    1.結晶紫的混合液

     將甲、乙兩液相混，靜置48h后過(guò)濾實(shí)用。此染液較穩定，在密閉的棕色瓶中可儲藏數月。

   2.碘液

     先用少量(3～5ml)蒸熘水溶解碘化鉀，再投入碘片，待碘全溶解后，加水稀釋至300ml。

   3.脫色液

   （1）95%乙醇

   （2）丙酮乙醇溶液：乙醇（95%）        70ml

            丙酮            30ml

   4.復染液

（二）染色步驟

   (1)用接種針挑取少許菌苔，涂布在干凈玻片上的一滴無(wú)菌水或蒸餾水中，風(fēng)干固定

   (2)用結晶紫的混合液染1min后，用水洗。

   (3)碘液作用1min,水洗，吸干。

   (4)用95％乙醇或丙酮乙醇溶液脫色，流滴至洗脫液至無(wú)色（約30s)。用番紅液染2-3min,水洗、風(fēng)干。

（三）結果觀(guān)察

   深紫色為革蘭氏染色陽(yáng)性細菌；紅色為革蘭氏染色陰性細菌。

（四）注意事項

   (1)所觀(guān)察的細胞一般為24h的培養物。

   (2)染色結果可疑時(shí)，以金黃色葡萄球菌為陽(yáng)性對照菌，以大腸埃希氏菌為陰性對照菌。

   本文節選自《常見(jiàn)細菌系統鑒定手冊》第十二章。

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